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核酸測定檢測

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發(fā)布時間：2025-08-02 05:51:51 更新時間：2025-08-01 05:51:51

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

核酸測定檢測作為現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)和臨床診斷的核心技術(shù)，在疾病防控、遺傳學(xué)研究、法醫(yī)學(xué)鑒定及公共衛(wèi)生監(jiān)測中扮演著關(guān)鍵角色。它通過分析樣本中特定的脫氧核糖核酸（DNA）或核糖核酸（RNA）序列，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)識別病原體（如病毒、細(xì)菌）、診斷遺傳性疾?。ㄈ绨┌Y基因突變）、評估感染狀況或追蹤流行病傳播。這一技術(shù)起源于分子生物學(xué)的發(fā)展，自PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）技術(shù)問世以來，核酸測定檢測已廣泛應(yīng)用于全球，特別是在COVID-19大流行期間，成為診斷SARS-CoV-2感染的黃金標(biāo)準(zhǔn)。其優(yōu)勢在于高靈敏度、特異性和快速性，能夠在早期階段檢測出微量核酸，從而助力及時干預(yù)和治療。隨著高通量測序和自動化的進(jìn)步，核酸測定檢測不僅提升了醫(yī)療診斷的效率，還推動了個性化醫(yī)療和精準(zhǔn)健康管理的發(fā)展。然而，它也面臨挑戰(zhàn)，如樣本污染風(fēng)險、設(shè)備成本高昂以及結(jié)果解讀的復(fù)雜性，這要求持續(xù)優(yōu)化技術(shù)和標(biāo)準(zhǔn)化操作流程。

檢測項(xiàng)目

核酸測定檢測的項(xiàng)目眾多，根據(jù)應(yīng)用場景的不同可分為幾大類。常見項(xiàng)目包括感染性疾病檢測（如SARS-CoV-2核酸檢測、HIV病毒載量測定、結(jié)核分枝桿菌檢測）、遺傳性疾病篩查（如囊性纖維化基因突變分析、唐氏綜合征產(chǎn)前診斷）、腫瘤相關(guān)檢測（如EGFR或BRCA基因突變檢測）、微生物鑒定（如食源性病原體或抗生素耐藥性檢測）以及法醫(yī)學(xué)中的DNA分型。這些項(xiàng)目在臨床實(shí)驗(yàn)室、研究機(jī)構(gòu)或流行病學(xué)調(diào)查中實(shí)施，每個項(xiàng)目針對特定目標(biāo)序列設(shè)計(jì)引物或探針，確保結(jié)果的針對性和可靠性。

檢測儀器

核酸測定檢測依賴于先進(jìn)的儀器設(shè)備，這些儀器自動化程度高，能提升通量和準(zhǔn)確性。核心儀器包括PCR熱循環(huán)儀（用于擴(kuò)增核酸）、實(shí)時熒光定量PCR儀（如羅氏LightCycler或Bio-Rad CFX系統(tǒng)，可實(shí)時監(jiān)測擴(kuò)增曲線）、核酸提取儀（如Qiagen QIAcube或Thermo KingFisher，用于純化樣本）、測序儀（如Illumina NovaSeq或Oxford Nanopore，用于高通量DNA/RNA測序）以及微流控芯片平臺（實(shí)現(xiàn)小型化和快速檢測）。輔助設(shè)備如離心機(jī)、恒溫器和生物安全柜也必不可少，以確保操作安全和避免交叉污染。這些儀器通過數(shù)字化接口優(yōu)化數(shù)據(jù)處理，使檢測過程高效且可追溯。

檢測方法

核酸測定檢測采用多種方法，每種方法依據(jù)原理和應(yīng)用選擇。主要方法包括聚合酶鏈反應(yīng)（PCR），用于靶序列擴(kuò)增；逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR），專門用于RNA病毒檢測（如將SARS-CoV-2的RNA轉(zhuǎn)化為DNA）；實(shí)時定量PCR（qPCR），結(jié)合熒光標(biāo)記實(shí)現(xiàn)定量分析；數(shù)字PCR（dPCR），提供絕對定量和高靈敏度；基因測序技術(shù)（如Sanger測序或下一代測序NGS），用于全面序列分析；以及核酸雜交法（如Southern blot或FISH），用于特定序列定位。這些方法通常涉及樣本準(zhǔn)備、核酸提取、擴(kuò)增和檢測步驟，需嚴(yán)格控制溫度、時間和試劑濃度以保證結(jié)果可靠性。

檢測標(biāo)準(zhǔn)

為確核酸測定檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性，國際和國家層面建立了嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)。國際標(biāo)準(zhǔn)包括ISO 15189（醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力要求），涵蓋質(zhì)量管理體系；ISO/IEC 17025（檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力），確保儀器校準(zhǔn)和結(jié)果驗(yàn)證；世界衛(wèi)生組織（WHO）指南（如針對COVID-19核酸測試的臨時指導(dǎo)）。國家層面，中國遵循GB/T 19438.1（病毒核酸檢測技術(shù)規(guī)范）和GB/T 27405（實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制指南）等。這些標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范樣本采集、存儲、檢測流程和結(jié)果報告，強(qiáng)調(diào)質(zhì)量控制（如使用陽性/陰性對照）、人員培訓(xùn)和定期審核，以減少誤差并提升整體可靠性。