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真菌檢測

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發(fā)布時間：2025-04-16 15:21:01 更新時間：2025-04-15 15:21:17

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

真菌檢測：核心檢測項目與方法解析

真菌廣泛存在于自然界，部分種類可引發(fā)人類疾病、動植物感染，或?qū)е率称芳碍h(huán)境中的污染問題。精準、高效的真菌檢測對臨床診斷、農(nóng)業(yè)防控、食品安全及環(huán)境監(jiān)測具有重要意義。本文重點解析真菌檢測的核心項目及常用技術(shù)，為不同領(lǐng)域的應(yīng)用提供參考。

一、真菌檢測的主要應(yīng)用場景

臨床醫(yī)學(xué)：檢測病原性真菌（如念珠菌、曲霉菌、隱球菌等），輔助診斷侵襲性真菌感染。
農(nóng)業(yè)與植物保護：檢測土壤、作物中的致病真菌（如鐮刀菌、疫霉菌等），預(yù)防病害爆發(fā)。
食品工業(yè)：檢測食品中的真菌毒素（如黃曲霉毒素、赭曲霉毒素）及腐敗真菌，保障食品安全。
環(huán)境監(jiān)測：評估空氣、水體及建筑環(huán)境中的真菌污染（如黑霉菌），防控健康風(fēng)險。

二、核心檢測項目與方法

1. 傳統(tǒng)檢測技術(shù)

真菌培養(yǎng)與形態(tài)學(xué)鑒定 原理：通過選擇性培養(yǎng)基（如沙氏培養(yǎng)基）分離真菌，觀察菌落形態(tài)、顏色及顯微結(jié)構(gòu)（孢子、菌絲等）。 適用樣本：組織、體液、土壤、食品等。 優(yōu)勢：成本低，可鑒定活菌。局限：耗時長（數(shù)天至數(shù)周），靈敏度低，部分真菌難以培養(yǎng)。
顯微鏡直接鏡檢 方法：使用KOH處理樣本或染色法（如革蘭氏染色、乳酸酚棉藍染色），直接觀察真菌結(jié)構(gòu)。 應(yīng)用：快速篩查皮膚、痰液等樣本中的真菌（如念珠菌假菌絲）。

2. 免疫學(xué)檢測

抗原/抗體檢測 原理：利用單克隆抗體檢測真菌特異性抗原（如隱球菌莢膜多糖抗原、曲霉菌半乳甘露聚糖）。 技術(shù)：ELISA、膠體金免疫層析、熒光免疫分析。 優(yōu)勢：快速（數(shù)小時），適用于早期診斷。局限：可能出現(xiàn)交叉反應(yīng)，需結(jié)合臨床判斷。
血清學(xué)檢測 項目：檢測患者血清中的真菌抗體（如念珠菌抗體、組織胞漿菌抗體），輔助診斷慢性或深部感染。

3. 分子生物學(xué)檢測

PCR及實時熒光定量PCR 靶標基因：真菌保守序列（如18S rRNA、ITS區(qū)）或特異性基因（如曲霉菌的β-微管蛋白基因）。 優(yōu)勢：高靈敏度、特異性，可區(qū)分真菌種屬。 應(yīng)用：血液、肺泡灌洗液等樣本的快速診斷。
宏基因組測序（mNGS） 原理：對樣本中全部微生物DNA進行高通量測序，識別致病真菌。 優(yōu)勢：無需培養(yǎng)，可檢測罕見或混合感染。局限：成本高，需專業(yè)生物信息學(xué)分析。
MALDI-TOF質(zhì)譜技術(shù) 方法：通過真菌蛋白質(zhì)譜特征進行快速鑒定。 適用場景：臨床實驗室對培養(yǎng)菌株的快速分型。

4. 真菌毒素檢測

色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù) 方法：HPLC、LC-MS/MS定量分析食品中的黃曲霉毒素、伏馬菌素等。 標準參考：需符合國家食品安全限量標準（如歐盟EC 1881/2006）。
免疫親和柱凈化法 步驟：樣本提取→免疫親和柱富集毒素→熒光或色譜檢測。 優(yōu)勢：高特異性，適用于復(fù)雜基質(zhì)（如谷物、飼料）。

5. 環(huán)境真菌監(jiān)測

空氣采樣與菌落計數(shù) 設(shè)備：使用撞擊式采樣器（如Andersen采樣器）收集空氣中的真菌孢子。分析：統(tǒng)計菌落形成單位（CFU/m³），評估空氣污染程度。
qPCR檢測環(huán)境樣本 靶標：特定真菌的生物標志物（如黑霉菌的過敏原蛋白基因）。

三、檢測方法的選擇與優(yōu)化

根據(jù)需求匹配技術(shù)：
- 臨床急診：優(yōu)先選擇免疫學(xué)或分子檢測（1-6小時出結(jié)果）。
- 科研或溯源：采用測序或質(zhì)譜技術(shù)。
多技術(shù)聯(lián)用：例如培養(yǎng)+PCR確認，或mNGS+血清學(xué)提高準確性。
質(zhì)量控制：定期驗證試劑靈敏度，避免交叉污染（尤其分子檢測）。