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溶血性鏈球菌溶菌素檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-08-02 05:20:22 更新時(shí)間：2025-08-01 05:20:23

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

溶血性鏈球菌溶菌素檢測(cè)簡(jiǎn)介

溶血性鏈球菌（Streptococcus pyogenes），屬于A組鏈球菌（GAS），是一種常見的人類病原菌，可引起咽炎、皮膚感染、猩紅熱等疾病，嚴(yán)重時(shí)可能導(dǎo)致風(fēng)濕熱、急性腎小球腎炎等并發(fā)癥。溶菌素是溶血性鏈球菌產(chǎn)生的主要毒性因子，主要包括鏈溶素O（Streptolysin O, SLO）和鏈溶素S（Streptolysin S, SLS）。這些溶菌素具有強(qiáng)烈的溶血活性，能破壞紅細(xì)胞膜，并在感染過程中引發(fā)免疫反應(yīng)。檢測(cè)溶血性鏈球菌溶菌素，特別是抗鏈溶素O抗體（ASO），在臨床診斷中至關(guān)重要，可用于評(píng)估患者是否曾感染該菌、監(jiān)測(cè)感染恢復(fù)情況或輔助診斷風(fēng)濕熱等自身免疫性疾病。這種檢測(cè)不僅幫助醫(yī)生制定治療方案，還在流行病學(xué)調(diào)查和疫苗效果評(píng)估中發(fā)揮關(guān)鍵作用。本文將全面介紹溶血性鏈球菌溶菌素檢測(cè)的各個(gè)方面，包括檢測(cè)項(xiàng)目、儀器、方法和標(biāo)準(zhǔn)。

檢測(cè)項(xiàng)目

溶血性鏈球菌溶菌素檢測(cè)的核心項(xiàng)目是抗鏈溶素O（ASO）抗體測(cè)試，這是臨床上最常用的指標(biāo)，用于評(píng)估血清中針對(duì)SLO的抗體水平。該檢測(cè)項(xiàng)目的主要目的是診斷或排除近期溶血性鏈球菌感染，尤其在風(fēng)濕熱、急性腎小球腎炎等并發(fā)癥的鑒別診斷中具有高特異性。其他輔助項(xiàng)目包括鏈溶素S（SLS）檢測(cè)，但應(yīng)用較少，因?yàn)镾LS抗體水平不穩(wěn)定，且不易標(biāo)準(zhǔn)化。ASO測(cè)試通常涉及定量或半定量測(cè)量血清抗體滴度，正常參考值范圍因?qū)嶒?yàn)室而異，但一般成人ASO水平低于200 IU/mL視為陰性，超過該閾值則提示近期感染或免疫反應(yīng)激活。此外，該項(xiàng)目還可結(jié)合其他鏈球菌抗原檢測(cè)（如DNA酶抗體測(cè)試）來提高診斷準(zhǔn)確性，確保對(duì)復(fù)雜病例的全面評(píng)估。

檢測(cè)儀器

進(jìn)行溶血性鏈球菌溶菌素檢測(cè)需要專門的儀器設(shè)備，以確保結(jié)果的精確性和可重復(fù)性。主要儀器包括酶標(biāo)儀（如BioTek Synergy H1或Thermo Scientific Multiskan FC），用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）中的吸光度讀??；自動(dòng)化免疫分析系統(tǒng)（如Abbott Architect ci8200或Roche Cobas e601），能高效處理大批量樣本，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)加樣、孵育和結(jié)果分析；以及分光光度計(jì)（如Shimadzu UV-1800），用于比色法檢測(cè)中的光密度測(cè)量。此外，實(shí)驗(yàn)室常配備離心機(jī)用于血清分離、恒溫孵育箱用于樣本反應(yīng)控制，和數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)（如LIMS）用于結(jié)果記錄與報(bào)告生成。這些儀器通過高靈敏度和低誤差率（通常<5%）確保檢測(cè)可靠性，符合現(xiàn)代臨床實(shí)驗(yàn)室的自動(dòng)化需求。

檢測(cè)方法

溶血性鏈球菌溶菌素檢測(cè)采用多種生物化學(xué)和免疫學(xué)方法，其中酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）是最常用且標(biāo)準(zhǔn)化的方法。該方法步驟包括：第一步，將鏈溶素O抗原包被到微孔板孔中；第二步，加入患者血清樣本，使其與抗原結(jié)合（溫育30-60分鐘）；第三步，洗去未結(jié)合物質(zhì)后，加入酶標(biāo)記的二抗（如辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗人IgG抗體）；第四步，加入底物（如TMB）進(jìn)行顯色反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化；最后，用酶標(biāo)儀讀取450nm波長(zhǎng)下的吸光度值，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算ASO抗體濃度。其他方法包括乳膠凝集試驗(yàn)（快速定性檢測(cè)，但不適用于定量分析）、中和試驗(yàn)（基于溶菌素的溶血活性抑制），以及分子生物學(xué)方法如PCR（用于基因水平檢測(cè)，但較少用于溶菌素本身）。選擇方法時(shí)需考慮靈敏度（ELISA可達(dá)1 ng/mL）和臨床實(shí)用性。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

溶血性鏈球菌溶菌素檢測(cè)需遵循嚴(yán)格的國(guó)際和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，以確保結(jié)果的可比性和臨床有效性。主要標(biāo)準(zhǔn)包括世界衛(wèi)生組織（WHO）指南（如WHO免疫學(xué)診斷手冊(cè)），規(guī)定ASO檢測(cè)的陽性閾值（成人≥200 IU/mL）、樣本處理規(guī)范和質(zhì)量控制要求；美國(guó)疾病控制與預(yù)防中心（CDC）推薦方法（如CDC血清學(xué)標(biāo)準(zhǔn)），強(qiáng)調(diào)靈敏度≥95%和特異性≥90%；以及ISO 15189醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系，要求定期校準(zhǔn)儀器并進(jìn)行內(nèi)部質(zhì)控（如使用商業(yè)質(zhì)控血清）。此外，參考標(biāo)準(zhǔn)如國(guó)際單位（IU）校準(zhǔn)品（如WHO國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品67/086）用于結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化，避免實(shí)驗(yàn)室間差異。檢測(cè)報(bào)告必須包含檢測(cè)限、參考范圍和不確定度評(píng)估，以符合CLSI（臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)）指南。這些標(biāo)準(zhǔn)共同保障檢測(cè)的準(zhǔn)確性，減少誤診風(fēng)險(xiǎn)。