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糞大腸菌群、大腸桿菌檢測

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發(fā)布時間：2025-09-02 00:50:34 更新時間：2025-09-01 00:50:35

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

糞大腸菌群與大腸桿菌檢測：方法、標(biāo)準(zhǔn)與儀器

糞大腸菌群和大腸桿菌檢測是環(huán)境監(jiān)測、食品安全和公共衛(wèi)生領(lǐng)域的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，主要用于評估水、食品、土壤等樣本的微生物污染程度，尤其是糞便污染指示。糞大腸菌群作為總大腸菌群的一個亞群，能在較高溫度下生長，常與人類和溫血動物的腸道相關(guān)，而大腸桿菌（Escherichia coli）則是糞大腸菌群中的特定種類，直接指示糞便污染和潛在病原體風(fēng)險。檢測這些指標(biāo)有助于預(yù)防水源性疾病、確保食品衛(wèi)生，并遵守相關(guān)法規(guī)。檢測過程通常涉及樣本采集、預(yù)處理、培養(yǎng)、鑒定和計數(shù)，要求嚴(yán)格的無菌操作和標(biāo)準(zhǔn)化流程，以避免交叉污染和假陽性結(jié)果。在全球范圍內(nèi)，各國衛(wèi)生機(jī)構(gòu)和標(biāo)準(zhǔn)組織（如WHO、EPA、ISO）制定了詳細(xì)的指南，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性。本文將重點(diǎn)介紹檢測項(xiàng)目、檢測儀器、檢測方法和檢測標(biāo)準(zhǔn)，以提供全面的技術(shù) overview。

檢測項(xiàng)目

檢測項(xiàng)目主要包括糞大腸菌群（Fecal Coliforms）和大腸桿菌（Escherichia coli）的定性或定量分析。糞大腸菌群檢測通常涉及在選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng)并計數(shù)能在44.5°C下產(chǎn)酸產(chǎn)氣的細(xì)菌，而大腸桿菌檢測則通過生化測試（如IMViC試驗(yàn)）或分子方法（如PCR）進(jìn)行特異性鑒定。這些項(xiàng)目常用于飲用水、廢水、食品（如乳制品、肉類）、環(huán)境樣本（如河流、土壤）的監(jiān)測，以評估衛(wèi)生狀況和潛在健康風(fēng)險。檢測結(jié)果通常以菌落形成單位（CFU/mL或CFU/g）表示，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)限值進(jìn)行評價，例如飲用水中的大腸桿菌不得檢出。

檢測儀器

檢測儀器在糞大腸菌群和大腸桿菌分析中扮演重要角色，包括培養(yǎng)設(shè)備、計數(shù)工具和自動化系統(tǒng)。常用儀器有：恒溫培養(yǎng)箱（用于在44.5°C下培養(yǎng)樣本）、顯微鏡（用于觀察菌落形態(tài)）、菌落計數(shù)器（自動或手動計數(shù)CFU）、PCR儀（用于分子檢測以快速鑒定大腸桿菌）、以及酶標(biāo)儀（用于比色法檢測，如基于β-葡萄糖醛酸苷酶活性的方法）。此外，快速檢測設(shè)備如免疫層析試紙或生物傳感器也日益普及，它們能縮短檢測時間至幾小時，提高效率。這些儀器的選擇取決于檢測方法、樣本類型和預(yù)算，需定期校準(zhǔn)和維護(hù)以確保準(zhǔn)確性。

檢測方法

檢測方法多樣，涵蓋傳統(tǒng)培養(yǎng)法和現(xiàn)代分子技術(shù)。傳統(tǒng)方法包括多管發(fā)酵法（Multiple-Tube Fermentation）和膜過濾法（Membrane Filtration），其中多管發(fā)酵法通過接種樣本到乳糖 broth 中，觀察產(chǎn)氣情況來推定糞大腸菌群，再通過EC broth 確認(rèn)；膜過濾法則將樣本過濾后，在選擇性培養(yǎng)基（如mFC agar）上培養(yǎng)，計數(shù)藍(lán)色菌落。對于大腸桿菌，常用方法有酶底物法（如Colilert試劑，基于ONPG和MUG水解）、以及分子方法如實(shí)時熒光PCR， targeting 特定基因（如uidA）。這些方法各有優(yōu)缺點(diǎn)：培養(yǎng)法成本低但耗時（24-48小時），而分子法快速（幾小時）但設(shè)備要求高。方法選擇應(yīng)基于樣本量、準(zhǔn)確度需求和法規(guī) compliance。

檢測標(biāo)準(zhǔn)

檢測標(biāo)準(zhǔn)由國際和國家機(jī)構(gòu)制定，以確保結(jié)果可靠和可比。常見標(biāo)準(zhǔn)包括：WHO的《飲用水質(zhì)量指南》（推薦大腸桿菌作為指示菌，限值為0 CFU/100mL）、美國EPA的Method 1603（用于水體中大腸桿菌的膜過濾法）、ISO 9308-1（水質(zhì)-大腸桿菌和大腸菌群的計數(shù)-膜過濾法）、以及中國GB 5749-2022《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（規(guī)定總大腸菌群和大腸桿菌不得檢出）。食品領(lǐng)域，標(biāo)準(zhǔn)如FDA的BAM Chapter 4和ISO 16649系列用于檢測食品中的大腸桿菌。這些標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了樣本處理、培養(yǎng)基、 incubation 條件、質(zhì)量控制（如陽性對照）和結(jié)果 interpretation，檢測實(shí)驗(yàn)室必須遵循以獲得認(rèn)證（如ISO 17025）。遵守標(biāo)準(zhǔn)有助于減少誤差，提升公共衛(wèi)生安全。