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亞硝基類檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-31 04:19:38 更新時(shí)間：2025-07-30 04:19:38

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

亞硝基類檢測(cè)概述

亞硝基類化合物（N-Nitroso Compounds, NOCs）是一類廣泛存在于環(huán)境和食品中的化學(xué)物質(zhì)，主要由亞硝酸鹽與胺類化合物在酸性條件下反應(yīng)生成。其中，許多亞硝胺類化合物（如N-亞硝基二甲胺 NDMA）被認(rèn)定為強(qiáng)致癌物和致突變物，對(duì)人類健康構(gòu)成顯著威脅。因此，對(duì)食品（如腌臘肉制品、啤酒、乳制品）、飲用水、化妝品、煙草、橡膠制品以及環(huán)境樣品（如土壤、廢水）中NOCs的含量進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)控至關(guān)重要。亞硝基類檢測(cè)的核心目標(biāo)是準(zhǔn)確測(cè)定樣品中目標(biāo)化合物的種類與含量，評(píng)估其潛在風(fēng)險(xiǎn)，為食品安全監(jiān)管、環(huán)境保護(hù)及工業(yè)生產(chǎn)質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。

主要檢測(cè)項(xiàng)目

根據(jù)應(yīng)用場(chǎng)景的不同，亞硝基類檢測(cè)項(xiàng)目主要涵蓋以下幾類：

食品與飲料：總亞硝胺、揮發(fā)性亞硝胺（如NDMA、N-亞硝基二乙胺 NDEA）、N-亞硝基吡咯烷 NPYR、N-亞硝基哌啶 NPIP）、亞硝酸鹽殘留量、硝酸鹽殘留量（可轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽）。
化妝品：特定亞硝胺（如NDMA、NDEA）及可亞硝化物質(zhì)。
環(huán)境樣品（水、土壤、空氣）：揮發(fā)性亞硝胺、亞硝酸鹽、硝酸鹽。
醫(yī)藥與化工產(chǎn)品：原料藥及中間體中的亞硝胺雜質(zhì)（如NDMA、NDEA等）。

常用檢測(cè)儀器

亞硝基類化合物的分析依賴于高靈敏度、高選擇性的儀器設(shè)備，主要包括：

氣相色譜儀 (GC)：尤其適用于揮發(fā)性亞硝胺（如NDMA、NDEA）的分離。
氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀 (GC-MS)：GC-MS，尤其是與熱能分析器（TEA）聯(lián)用（GC-TEA）曾是亞硝胺檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)”，提供高選擇性和靈敏度。
高效液相色譜儀 (HPLC)：適用于非揮發(fā)性或熱不穩(wěn)定亞硝基化合物及亞硝酸鹽/硝酸鹽的分析。
高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀 (HPLC-MS/MS)：當(dāng)前的主流技術(shù)，具有極高的靈敏度、選擇性和準(zhǔn)確性，可同時(shí)檢測(cè)多種目標(biāo)物，是痕量亞硝胺檢測(cè)的首選。
離子色譜儀 (IC)：常用于測(cè)定亞硝酸鹽和硝酸鹽含量。
紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)：用于基于顯色反應(yīng)（如Griess法）的亞硝酸鹽定量測(cè)定。

主要檢測(cè)方法

亞硝基類化合物的檢測(cè)通常需要經(jīng)過(guò)樣品前處理和目標(biāo)物分析兩大步驟：

樣品前處理：
- 提取：根據(jù)基質(zhì)不同，常用方法包括液液萃?。↙LE）、固相萃取（SPE）、蒸餾（尤其是同時(shí)蒸餾萃取SDE）、頂空（HS）、固相微萃?。⊿PME）等，以將目標(biāo)物從復(fù)雜基質(zhì)中分離富集。
- 凈化：去除共提取的干擾物質(zhì)，常用SPE柱（如硅膠、弗羅里硅土、C18）或凝膠滲透色譜（GPC）。
- 衍生化（必要時(shí)）：對(duì)于某些不易直接檢測(cè)的化合物或?yàn)榱颂岣邫z測(cè)靈敏度/選擇性，可能需要進(jìn)行衍生化反應(yīng)（如亞硝胺的脫亞硝基化后測(cè)定相應(yīng)胺類）。
儀器分析：
- GC-MS(/MS)：樣品經(jīng)提取凈化后，通過(guò)GC分離，MS進(jìn)行定性和定量分析。電子轟擊源（EI）是常用電離方式。
- LC-MS/MS：尤其適用于非揮發(fā)性和熱不穩(wěn)定亞硝胺。常采用電噴霧電離源（ESI）或大氣壓化學(xué)電離源（APCI），在多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式下進(jìn)行高靈敏度定量。
- 光度法（亞硝酸鹽）：如格里斯試劑法（Griess Reagent），亞硝酸鹽在酸性條件下與對(duì)氨基苯磺酰胺反應(yīng)生成重氮鹽，再與N-(1-萘基)乙二胺偶聯(lián)生成紫紅色染料，在540 nm左右比色測(cè)定。
- 離子色譜法（亞硝酸鹽/硝酸鹽）：利用陰離子交換柱分離，電導(dǎo)檢測(cè)器或紫外檢測(cè)器進(jìn)行測(cè)定。

重要檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

亞硝基類檢測(cè)需遵循嚴(yán)格的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，以確保結(jié)果的可比性和可靠性，常見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)包括：

食品領(lǐng)域：
- GB 5009.26-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中N-亞硝胺類化合物的測(cè)定》 (中國(guó)，規(guī)定了GC-MS, GC-TEA法)。
- GB 5009.33-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測(cè)定》 (中國(guó)，含光度法、離子色譜法、液相色譜法等)。
- AOAC Official Method 992.15: Volatile N-Nitrosamines in Fried Bacon (GC-TEA)。
- ISO 6465:1984《Rubber, vulcanized - Determination of N-nitrosamines - Spectrometric method》 (雖為橡膠標(biāo)準(zhǔn)，方法有參考價(jià)值)。
水質(zhì)領(lǐng)域：
- GB/T 5750.10-2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法亞硝酸鹽氮》 (中國(guó))。
- EPA Method 521: Determination of Nitrosamines in Drinking Water by Solid Phase Extraction and Capillary Column Gas Chromatography with Large Volume Injection and Chemical Ionization Tandem Mass Spectrometry (MS/MS)。
藥品領(lǐng)域：
- ICH M7(R1): Assessment and Control of DNA Reactive (Mutagenic) Impurities in Pharmaceuticals to Limit Potential Carcinogenic Risk (對(duì)亞硝胺等基因毒性雜質(zhì)有嚴(yán)格限量要求)。
- 各國(guó)藥典（如USP, EP, ChP）中關(guān)于特定藥物中亞硝胺雜質(zhì)檢測(cè)的專論或指導(dǎo)原則。
化妝品領(lǐng)域：
- 中國(guó)《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》(2015年版) 規(guī)定了禁用亞硝基物質(zhì)（亞硝基二乙醇胺等）及其檢測(cè)方法。
- 歐盟化妝品法規(guī)(EC) No 1223/2009 對(duì)亞硝胺和可亞硝化物質(zhì)有嚴(yán)格限制。

選擇合適的檢測(cè)方法必須嚴(yán)格依據(jù)相關(guān)產(chǎn)品的具體法規(guī)要求和限量標(biāo)準(zhǔn)（如食品中的最大殘留限量MRLs，飲用水中的最大污染物水平MCLs，藥品中的可接受攝入量AI等），并確保實(shí)驗(yàn)室具備相應(yīng)的資質(zhì)和能力驗(yàn)證。