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磺胺間甲氧嘧啶(SMM)檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-26 13:36:55 更新時(shí)間：2025-07-25 13:36:55

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

磺胺間甲氧嘧啶(SMM)檢測(cè)概述

磺胺間甲氧嘧啶(Sulfamonomethoxine, SMM)是一種人工合成的磺胺類(lèi)廣譜抗菌藥物，廣泛用于畜禽及水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中，以預(yù)防和治療細(xì)菌性疾病。然而，SMM在動(dòng)物體內(nèi)的代謝相對(duì)緩慢，若使用不當(dāng)或未嚴(yán)格遵守休藥期，可能導(dǎo)致其在動(dòng)物源性食品（如肌肉、肝臟、腎臟、奶、蛋、蜂蜜等）中殘留。人類(lèi)長(zhǎng)期或過(guò)量攝入含有SMM殘留的食品，可能引起過(guò)敏反應(yīng)、破壞腸道菌群平衡，并可能導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生，對(duì)公共衛(wèi)生安全構(gòu)成潛在威脅。因此，建立靈敏、準(zhǔn)確、高效的磺胺間甲氧嘧啶殘留檢測(cè)方法，對(duì)保障食品安全、監(jiān)控獸藥合理使用、保護(hù)消費(fèi)者健康具有重要意義。

檢測(cè)項(xiàng)目

磺胺間甲氧嘧啶(SMM)檢測(cè)的核心項(xiàng)目是定量或定性測(cè)定其在各類(lèi)可食用動(dòng)物組織（肌肉、脂肪、肝臟、腎臟）、體液（奶、血液）、禽蛋及蜂產(chǎn)品等基質(zhì)中的殘留量。檢測(cè)對(duì)象既包括SMM原型藥物，有時(shí)也涵蓋其主要代謝產(chǎn)物（如N4-乙?；x物），以確保全面評(píng)估殘留風(fēng)險(xiǎn)。檢測(cè)目的通常包括：監(jiān)督執(zhí)法（驗(yàn)證是否符合最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)）、養(yǎng)殖過(guò)程監(jiān)控、食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及進(jìn)出口檢驗(yàn)檢疫。

檢測(cè)儀器

現(xiàn)代磺胺間甲氧嘧啶殘留檢測(cè)主要依賴(lài)先進(jìn)的色譜和質(zhì)譜技術(shù)，常用儀器包括：

高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀 (HPLC-MS/MS)：是目前檢測(cè)SMM殘留的“金標(biāo)準(zhǔn)”儀器。HPLC實(shí)現(xiàn)復(fù)雜基質(zhì)中目標(biāo)物的有效分離，三重四極桿質(zhì)譜(MS/MS)通過(guò)選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)(SRM)模式提供極高的選擇性和靈敏度，能準(zhǔn)確定量痕量水平的SMM。
高效液相色譜儀 (HPLC)：配備紫外(UV)檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器(DAD)。雖然靈敏度和特異性通常低于LC-MS/MS，但在配備合適的檢測(cè)器和優(yōu)化色譜條件后，仍可用于某些基質(zhì)中SMM的檢測(cè)，尤其適用于實(shí)驗(yàn)室初步篩查或資源受限的情況。
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定儀 (ELISA Reader)：基于抗原抗體特異性反應(yīng)的原理。ELISA試劑盒操作相對(duì)簡(jiǎn)便、快速、成本較低，適用于大批量樣品的現(xiàn)場(chǎng)快速篩查。但其定量準(zhǔn)確性和抗基質(zhì)干擾能力通常不如色譜方法，陽(yáng)性結(jié)果需用確證方法如LC-MS/MS進(jìn)一步驗(yàn)證。
氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀 (GC-MS/MS)：通常需要將SMM衍生化使其具有揮發(fā)性后才能分析。相比于LC-MS/MS，在SMM檢測(cè)中應(yīng)用相對(duì)較少，但在一些特定方法或歷史方法中可能使用。
固相萃取裝置 (SPE) / 液液萃取裝置：并非檢測(cè)儀器本身，但作為關(guān)鍵的樣品前處理設(shè)備，用于從復(fù)雜基質(zhì)中提取、凈化和富集目標(biāo)物，消除干擾，對(duì)后續(xù)儀器的準(zhǔn)確檢測(cè)至關(guān)重要。

檢測(cè)方法

SMM殘留檢測(cè)方法的核心流程通常包括：樣品制備、提取、凈化和儀器分析。

樣品制備：將待測(cè)樣品（如肌肉、肝臟）均勻粉碎、混勻。
提取：利用合適的溶劑（常用乙腈、酸化乙腈、甲醇或緩沖溶液等），將SMM及其代謝物從樣品基質(zhì)中溶解出來(lái)。均質(zhì)、振蕩或超聲輔助可提高提取效率。
凈化：去除提取液中干擾檢測(cè)的脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、色素等雜質(zhì)。常用凈化技術(shù)包括：
- 固相萃取(SPE)：最常用。利用特定填料的SPE小柱（如C18, HLB, MCX等）選擇性吸附目標(biāo)物或雜質(zhì)。
- QuEChERS法：快速、簡(jiǎn)便、有效、廉價(jià)、耐用、安全。利用乙腈提取，加入鹽包（MgSO4, NaCl等）分層，再使用分散SPE吸附劑（PSA, C18, GCB等）凈化。
- 液液萃取(LLE)：利用目標(biāo)物在不同溶劑中的分配系數(shù)差異進(jìn)行分離凈化。
儀器分析：
- LC-MS/MS法：凈化后的樣品溶液注入LC-MS/MS系統(tǒng)。流動(dòng)相通常為甲醇/乙腈-水（含乙酸或甲酸銨緩沖鹽）。色譜柱常用C18反相色譜柱。質(zhì)譜在電噴霧離子源(ESI)正離子模式下，監(jiān)測(cè)SMM的特征母離子及子離子對(duì)進(jìn)行定量（如SMM: m/z 281 > 156, 108; 或根據(jù)具體儀器條件優(yōu)化）。
- HPLC-UV/DAD法：凈化液經(jīng)HPLC分離，SMM通常在270nm左右有特征紫外吸收峰，通過(guò)外標(biāo)或內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量。
- ELISA法：按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，將樣品提取/稀釋液加入包被抗體的微孔板，加入酶標(biāo)記物和底物顯色，在酶標(biāo)儀上讀取吸光度值，通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)比較計(jì)算濃度。
數(shù)據(jù)處理與報(bào)告：根據(jù)儀器產(chǎn)生的信號(hào)（峰面積、吸光度等），利用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算出樣品中SMM的準(zhǔn)確含量，并出具檢測(cè)報(bào)告。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

世界各國(guó)及國(guó)際組織均制定了動(dòng)物源性食品中磺胺間甲氧嘧啶的最高殘留限量(MRLs)標(biāo)準(zhǔn)和相應(yīng)的檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)。常見(jiàn)的標(biāo)準(zhǔn)包括：

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB)：
- MRL標(biāo)準(zhǔn)：《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中獸藥最大殘留限量》(GB 31650)。例如：肌肉、脂肪、肝、腎中SMM的MRL通常為100 μg/kg；牛奶中為25 μg/kg；雞蛋中為100 μg/kg。
- 檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)：
  - GB 29741《動(dòng)物源性食品中磺胺類(lèi)藥物殘留量的測(cè)定高效液相色譜法》
  - GB/T 20759《畜禽肉中十六種磺胺類(lèi)藥物殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》
  - GB/T 21316《動(dòng)物源性食品中磺胺類(lèi)藥物殘留量的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》
  - GB/T 22947《蜂王漿中十八種磺胺類(lèi)藥物殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》等。
國(guó)際食品法典委員會(huì)(CAC)：其制定的MRL標(biāo)準(zhǔn)是重要的國(guó)際參考依據(jù)。
歐盟標(biāo)準(zhǔn)：歐盟法規(guī)(EC) No 37/2010制定了詳細(xì)的獸藥MRLs。歐盟常用參考方法如Commission Decision 2002/657/EC規(guī)定了確證方法的性能要求。
美國(guó)FDA標(biāo)準(zhǔn)：定義允許限量(Tolerances)，并有相應(yīng)的檢測(cè)指南。
日本肯定列表制度：也規(guī)定了SMM在各類(lèi)食品中的限量要求。

實(shí)驗(yàn)室在進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，必須嚴(yán)格遵循適用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)際公認(rèn)的權(quán)威方法標(biāo)準(zhǔn)，以確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性和法律效力。

結(jié)語(yǔ)

磺胺間甲氧嘧啶(SMM)殘留檢測(cè)是保障動(dòng)物源性食品安全的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。隨著分析技術(shù)的飛速發(fā)展，特別是LC-MS/MS等高靈敏度、高特異性?xún)x器的普及，以及QuEChERS等高效前處理方法的廣泛應(yīng)用，SMM殘留檢測(cè)的效率和準(zhǔn)確度不斷提高。嚴(yán)格遵循國(guó)家法規(guī)和檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，運(yùn)用科學(xué)可靠的檢測(cè)項(xiàng)目和先進(jìn)精密的檢測(cè)儀器與方法，能夠有效監(jiān)控SMM在食品中的殘留水平，為食品安全監(jiān)管提供強(qiáng)有力的技術(shù)支撐，切實(shí)保護(hù)消費(fèi)者的餐桌安全與身體健康。