1、 實(shí)驗(yàn)用病毒：感染毒株為SHIVSF162p3中國(guó)恒河猴細(xì)胞適應(yīng)株，中國(guó)恒河猴PBMCs滴定病毒原液TCID50滴度為1×10⁴ TCID₅₀/mL。

2、 感染動(dòng)物：選用體重4-6kg的SPF恒河猴。實(shí)驗(yàn)前體檢無(wú)異常，必須排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆轉(zhuǎn)錄D型病毒(SRV-1，2，5)和猴T淋巴細(xì)胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒（SIV）易感性密切相關(guān)的4種基因（Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17）篩查結(jié)果為陰性。所有感染動(dòng)物必須在ABSL-3室中進(jìn)行。

3、 感染方法：將麻醉好的實(shí)驗(yàn)猴放在操作臺(tái)上，動(dòng)物采取俯臥位以保證直腸粘膜充分暴露，緩慢將SHIVSF162p3中國(guó)恒河猴細(xì)胞適應(yīng)株的稀釋液注入肛竇處，實(shí)驗(yàn)猴保持此姿勢(shì)30min。

4、 SHIVSF162p3直腸感染猴樣品采集和指標(biāo)測(cè)定：感染采取小量多次的方法，共感染21次。前3次接種的病毒濃度為1 TCID₅₀/mL，然后2 TCID₅₀/mL接種3次，10 TCID₅₀/mL接種3次，20 TCID₅₀/mL接種3次，最后30 TCID₅₀/mL接種5次，每次接種間隔4-7d。在每次感染前及21次感染結(jié)束后,采EDTA抗凝血3mL，分別測(cè)定外周血CD4+/CD8+比值及血漿病毒載量。

5、 SHIVSF162p3直腸感染猴血漿病毒載量的測(cè)定：提取EDTA抗凝血漿中病毒RNA，使用SYBR Green I 實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法測(cè)定血漿病毒載量。

6、 SHIVSF162p3直腸感染猴外周血CD4+/CD8+比值及絕對(duì)數(shù)測(cè)定：CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗體標(biāo)記EDTA抗凝全血淋巴細(xì)胞，流式細(xì)胞儀測(cè)定CD4+/CD8+比值，并根據(jù)血常規(guī)結(jié)果，計(jì)算出CD4+T細(xì)胞絕對(duì)數(shù)。