3.1實驗用小鼠的選擇：

選擇年齡6~8周齡，體重16~20g， SPF級雌性C57BL/6和BALB/c小鼠（提供廠商:中國醫(yī)學科學院實驗動物研究所）。動物使用申請?zhí)?中國醫(yī)學科學院實驗動物研究所實驗動物管理委員會（批準號：MC—09-2003）。

3.2飼養(yǎng)環(huán)境：

動物生物安全3級實驗室（ABSL-3）；溫濕度范圍：18-28℃；相對濕度：40-70％；換氣次數(shù)：機械送排風；明暗周期：12h/12h；照度：150-300Lux；清潔消毒：用具、籠架等在投入使用前進行消毒；籠具種類及飼育密度：小鼠籠，12只一籠；

3.3飼養(yǎng)條件

中國醫(yī)學科學院實驗動物研究所華阜康有限公司小鼠專用飼料,自由采食；墊料為中國醫(yī)學科學院實驗動物研究所華阜康有限公司，定期更換；飲水；普通自來水經(jīng)過高壓(121℃,30min)，自由飲用。

3.4實驗用小鼠的分組及感染

實驗共分為三個大組，第一組為C57BL/6尾靜脈注射組、第二組為C57BL/6腹腔注射組和第三組為BALB/c尾靜脈注射組，其中每一個大組中分四個小組：正常對照組(生理鹽水)、高劑量組（1X10⁶CFU）、中劑量組（1X10⁵ CFU）和低劑量組（1X10⁴ CFU），每組12只小鼠，共144只小鼠。

3.5感染用菌株

用結(jié)核分枝桿菌標準菌株H37Rv株或結(jié)核耐藥株（內(nèi)部編號94789）。

3.6觀察

小鼠在進入ABSL-3實驗室之后,觀察4~5天后,進行感染實驗。感染后，觀察每天感染小鼠的臨床癥狀，并每周稱取小鼠體重，觀察不同感染方式和不同感染劑量小鼠體重的變化規(guī)律。

3.7病理檢查和組織荷菌量計數(shù)

分別在感染后6周、8周和10周，每組解剖3只小鼠，分別無菌取小鼠1/2脾臟、1/2肺臟，無菌研磨后接種L-J斜面進行結(jié)核分枝桿菌的分離培養(yǎng)。并將同一組織的剩余部分固定在10%福爾馬林中，進行病理切片。