3.1實驗用豚鼠的選擇：

選擇體重:300~350g SPF級，雌性Hartley豚鼠（提供廠商：北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司）。動物使用申請?zhí)?中國醫(yī)學科學院實驗動物研究所實驗動物管理委員會（批準號：MC—09-2003）。

3.2飼養(yǎng)環(huán)境

—動物生物安全3級實驗室（ABSL-3）；溫濕度范圍：18-28℃；相對濕度：40-70％；換氣次數(shù)：機械送排風；明暗周期：12h/12h；照度：150-300Lux；清潔消毒：用具、籠架等在投入使用前進行消毒；籠具種類及飼育密度：豚鼠籠，3只一籠；

3.3飼養(yǎng)條件

飼料:中國醫(yī)學科學院實驗動物研究所華阜康有限公司豚鼠專用飼料,自由采食；墊料為中國醫(yī)學科學院實驗動物研究所華阜康有限公司，定期更換；飲水；普通自來水經(jīng)過高壓(121℃,30min)，自由飲用。

3.4觀察

豚鼠在進入ABSL-3實驗室之后，進行檢疫，PPD陰性者，觀察4~5天后，進行感染實驗.

3.5實驗用豚鼠的分組及感染：

實驗共分為四個大組，第一組為正常對照組(生理鹽水)、第二組為高劑量組（1X10⁴ CFU）、第三組為中劑量組（1X10³ CFU）和第四組低劑量組（1X10² CFU）。每組36只均，共144只（5只備用，實際為150只），均采用后肢蹊部皮下注射。

3.6感染用菌株

結(jié)核分枝桿菌標準菌株Dt株（ATCC 35810）和結(jié)核菌耐藥株（內(nèi)部編號94789）

3.7實驗觀察

感染后，每天觀察感染豚鼠的臨床癥狀，每周稱取豚鼠體重，觀察不同感染劑量豚鼠體重和臟器指數(shù)的變化規(guī)律。

3.8解剖后病理和荷菌量檢測

分別在感染后1d、2d、3d、5周和6周，每組解剖6只豚鼠，分別無菌活體心臟取血，并在解剖后1/2脾臟、1/2肺臟和1個腹股溝淋巴結(jié)，無菌研磨后接種L-J斜面進行結(jié)核分枝桿菌的分離培養(yǎng)。并將同一組織的剩余部分固定在10%福爾馬林中，進行病理切片。