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大腸桿菌檢測

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發(fā)布時間：2025-04-14 13:09:35 更新時間：2025-04-13 13:43:46

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

大腸桿菌檢測：關(guān)鍵檢測項目與方法解析

大腸桿菌（Escherichia coli）是腸道菌群的重要組成部分，但某些致病性菌株（如O157:H7）可能引發(fā)嚴重疾病。因此，大腸桿菌檢測在食品安全、水質(zhì)監(jiān)測、醫(yī)療診斷和環(huán)境衛(wèi)生等領(lǐng)域具有重要意義。本文將重點解析大腸桿菌檢測的核心項目和方法。

一、檢測目的與意義

食品安全：防止致病菌污染食品（如肉類、乳制品、生鮮蔬菜）。
水質(zhì)安全：評估飲用水、地表水及廢水的微生物污染水平。
臨床診斷：檢測感染性腹瀉患者的病原菌。
環(huán)境衛(wèi)生：監(jiān)控公共場所（如醫(yī)院、游泳池）的衛(wèi)生狀況。

二、核心檢測項目

1. 常規(guī)培養(yǎng)法檢測

原理：利用選擇性培養(yǎng)基分離并鑒定大腸桿菌。
關(guān)鍵步驟：
- 初發(fā)酵：將樣品接種至含乳糖的液體培養(yǎng)基（如LST肉湯），觀察產(chǎn)氣情況。
- 分離培養(yǎng)：陽性樣本接種至伊紅美藍瓊脂（EMB）或麥康凱瓊脂，觀察典型菌落（金屬光澤或粉紅色）。
- 生化驗證：通過吲哚試驗、甲基紅試驗（MR）、V-P試驗等確認種屬。
應(yīng)用：國際標(biāo)準(zhǔn)方法（如ISO 16649、GB 4789.3）。

2. 大腸菌群與耐熱大腸菌群檢測

總大腸菌群：指示水體或食品受糞便污染的程度。
耐熱大腸菌群（糞大腸菌群）：在44.5℃下生長的大腸菌群，特異性指示糞便污染。
檢測方法：多管發(fā)酵法（MPN）、濾膜法。

3. 致病性大腸桿菌檢測

針對特定致病毒素或基因的檢測：

腸毒素型大腸桿菌（ETEC）：檢測熱穩(wěn)定毒素（ST）和熱不穩(wěn)定毒素（LT）。
腸出血型大腸桿菌（EHEC）：檢測志賀毒素基因（stx1/stx2）和黏附因子（eae）。
分子生物學(xué)方法：PCR、實時熒光PCR檢測毒力基因。

4. 大腸桿菌O157:H7特異性檢測

免疫學(xué)方法：膠體金試紙條檢測O157抗原。
分子檢測：靶向rfbE（O抗原基因）和fliC（H抗原基因）的PCR技術(shù)。

5. 快速檢測技術(shù)

酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）：檢測毒素或表面抗原。
生物傳感器：利用納米材料或光學(xué)技術(shù)實現(xiàn)實時監(jiān)測。
流式細胞術(shù)：快速計數(shù)樣本中的活菌數(shù)量。

6. 抗生素敏感性檢測

目的：指導(dǎo)臨床治療，監(jiān)控耐藥性傳播。
方法：紙片擴散法（K-B法）、最小抑菌濃度（MIC）測定。

三、檢測標(biāo)準(zhǔn)與法規(guī)

國際標(biāo)準(zhǔn)：
- ISO 16649（食品中大腸桿菌計數(shù)）
- EPA 1103.1（水質(zhì)大腸桿菌檢測）
中國國家標(biāo)準(zhǔn)：
- GB 4789.3-2016（食品微生物學(xué)檢驗）
- GB/T 5750.12-2006（生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法）

四、技術(shù)對比與選擇建議

方法	靈敏度	耗時	成本	適用場景
傳統(tǒng)培養(yǎng)法	高	24-72h	低	實驗室常規(guī)檢測
PCR技術(shù)	極高	4-6h	高	快速鑒定致病菌株
免疫層析試紙	中	15-30min	中	現(xiàn)場快速篩查
生物傳感器	高	實時	高	在線監(jiān)測、高靈敏度需求場景