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茶多酚檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-03-28 16:51:27 更新時(shí)間：2025-03-27 16:52:59

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

一、檢測(cè)目的與標(biāo)準(zhǔn)

茶多酚（Tea Polyphenols）是茶葉中的核心活性成分，檢測(cè)其含量用于評(píng)估茶葉品質(zhì)、食品添加劑功效及保健品原料質(zhì)量。核心依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)：

中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)：
- GB/T 8313-2018《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的檢測(cè)方法》
- GB 1886.331-2020《食品添加劑茶多酚》
國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)：
- ISO 14502-1:2023（茶葉中多酚類物質(zhì)測(cè)定-分光光度法）
- AOAC 991.25-2023（綠茶提取物中兒茶素含量的HPLC法）

二、核心檢測(cè)方法及步驟

1. Folin-Ciocalteu分光光度法（快速定量）

適用場(chǎng)景：茶葉原料、茶飲料、保健品中總多酚的快速篩查。步驟：

樣品前處理：
- 茶葉粉碎過(guò)60目篩，取0.2g加入70%甲醇（v/v），80℃水浴提取30分鐘，離心取上清液。
顯色反應(yīng)：
- 取0.5mL提取液，加2.5mL Folin-Ciocalteu試劑（10%稀釋），靜置5分鐘。
- 加入2mL 7.5% Na?CO?溶液，定容至10mL，室溫避光反應(yīng)60分鐘。
吸光度測(cè)定：
- 在765nm波長(zhǎng)下測(cè)吸光度，以沒(méi)食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（濃度范圍0-100μg/mL）。
計(jì)算：茶多酚含量(%)=C×V×Dm×106×100茶多酚含量(%)=m×106C×V×D?×100 （C：標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)應(yīng)濃度μg/mL；V：提取液體積mL；D：稀釋倍數(shù)；m：樣品質(zhì)量g）

合格標(biāo)準(zhǔn)：綠茶茶多酚≥20%（干基），紅茶≥10%（GB/T 8313）。

2. 高效液相色譜法（HPLC，精確組分分析）

適用場(chǎng)景：兒茶素（EGCG、ECG等）單體含量測(cè)定（如藥品級(jí)茶多酚）。步驟：

色譜條件：
- 色譜柱：C18柱（250mm×4.6mm，5μm）。
- 流動(dòng)相：A相（0.1%甲酸水），B相（乙腈），梯度洗脫（0-20min，B相5%→25%）。
- 流速：1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：278nm，柱溫：30℃。
標(biāo)準(zhǔn)品配制：
- EGCG、ECG、EC等標(biāo)準(zhǔn)品溶解于甲醇，濃度梯度為5-100μg/mL。
樣品處理：
- 同分光光度法提取步驟，過(guò)0.45μm濾膜后進(jìn)樣10μL。
定量分析：
- 根據(jù)保留時(shí)間與峰面積計(jì)算各單體含量。

三、檢測(cè)設(shè)備與試劑

設(shè)備/試劑	功能要求	示例型號(hào)/品牌
紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)	波長(zhǎng)范圍190-900nm，精度±0.5nm	Shimadzu UV-2600、Thermo Genesys 150
高效液相色譜儀	二元梯度泵，DAD檢測(cè)器	Agilent 1260、Waters Alliance e2695
Folin-Ciocalteu試劑	2N濃度，避光保存	Sigma-Aldrich F9252
兒茶素標(biāo)準(zhǔn)品	EGCG（≥98%）、ECG（≥95%）	Chengdu Herbpurify、Sigma E4143

四、常見(jiàn)問(wèn)題與解決方案

問(wèn)題	原因分析	解決方案
顯色后沉淀	提取液含果膠或蛋白質(zhì)	增加離心速度（≥8000rpm）或過(guò)濾處理
標(biāo)準(zhǔn)曲線線性差	顯色時(shí)間不足或試劑失效	控制顯色時(shí)間（60±2min），更換新試劑
HPLC峰分離度低	梯度洗脫程序或柱效不足	優(yōu)化梯度（如B相20%→30%），更換新色譜柱
樣品氧化降解	提取溫度過(guò)高或未避光操作	控制水浴溫度≤80℃，全程避光操作

五、應(yīng)用場(chǎng)景與建議

茶葉品質(zhì)分級(jí)：
- 高等級(jí)綠茶：EGCG含量≥10%（干基），總多酚≥25%。
- 普洱茶熟茶：茶多酚含量5-15%（發(fā)酵后部分降解）。
食品添加劑合規(guī)性：
- 依據(jù)GB 1886.331，食品級(jí)茶多酚需符合：EGCG≥50%，咖啡因≤5%。
保健品開發(fā)：
- 采用HPLC法精確控制活性成分比例（如EGCG:ECG≈4:1），確保功效穩(wěn)定性。

通過(guò)系統(tǒng)化檢測(cè)，茶多酚的含量與組分可精準(zhǔn)指導(dǎo)茶葉加工、食品添加劑生產(chǎn)及藥品研發(fā)。建議根據(jù)需求選擇分光光度法（快速經(jīng)濟(jì)）或HPLC法（高精度），并通過(guò)CMA/CNAS認(rèn)證實(shí)驗(yàn)室確保數(shù)據(jù)權(quán)威性。