您現(xiàn)在的位置：首頁 > 檢測項目 > 其他檢測

河豚毒素檢測

1對1客服專屬服務(wù)，免費(fèi)制定檢測方案，15分鐘極速響應(yīng)

可選形式：電子報告紙質(zhì)報告

可選語言：中文報告英文報告

發(fā)布時間：2025-03-12 14:36:32 更新時間：2025-03-11 14:39:02

點(diǎn)擊：0

作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

河豚毒素（Tetrodotoxin, TTX）是一種劇毒神經(jīng)毒素，主要存在于河豚魚、蠑螈等生物體內(nèi)，檢測需圍繞 毒素定性定量、樣本前處理、靈敏度及快速篩查 等核心指標(biāo)展開，適用于食品安全、中毒急救及法醫(yī)鑒定等領(lǐng)域。以下是基于 GB 5009.XXX-202X（食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)）、ISO 28540:2021（水產(chǎn)品毒素檢測） 及 AOAC 991.31（生物毒素分析方法） 的系統(tǒng)化檢測方案：

一、核心檢測方法

方法	原理	靈敏度	適用場景
小鼠生物測定法	腹腔注射樣本提取液，觀察小鼠死亡時間推算毒素濃度	0.2~1 MU/g	傳統(tǒng)法（實(shí)驗室）
酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）	抗原-抗體特異性結(jié)合，顯色反應(yīng)定量毒素	1~10 ng/mL	現(xiàn)場快速篩查
液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS/MS）	色譜分離+質(zhì)譜定性定量	0.1~1 ng/g	高精度確認(rèn)分析
細(xì)胞毒性分析法	毒素抑制神經(jīng)細(xì)胞鈉通道，檢測細(xì)胞存活率	0.5~5 ng/mL	科研與毒理研究

二、檢測流程（以LC-MS/MS為例）

1. 樣本采集與前處理

樣本類型：河豚魚肝臟、卵巢、肌肉（毒素富集部位）；
提取：
1. 均質(zhì)樣本后，加入0.1%乙酸-甲醇（1:1, v/v）超聲提取30分鐘；
2. 離心（10,000×g, 10min），取上清液過0.22μm濾膜；
3. 固相萃?。⊿PE，C18柱）凈化，氮吹濃縮。

2. 儀器分析條件

色譜條件：
- 色譜柱：C18柱（2.1×100mm, 1.7μm）；
- 流動相：A相（0.1%甲酸水），B相（乙腈）；
- 梯度洗脫：0~5min，B相5%→95%。
質(zhì)譜條件：
- 離子源：電噴霧電離（ESI+）；
- 監(jiān)測離子對（m/z）：TTX [320.1→162.1, 302.1→256.1]。

3. 定量與判定

標(biāo)準(zhǔn)曲線：0.5~100 ng/mL線性范圍（R²≥0.99）；
檢出限（LOD）：0.1 ng/g，定量限（LOQ）：0.5 ng/g；
安全限值：河豚魚可食部位TTX≤10 μg/kg（GB 2763-2021）。

三、快速篩查（ELISA法）

試劑盒：如Eurofins Abraxis TTX ELISA Kit（檢測范圍1~50 ng/mL）；
步驟：
1. 樣本提取液稀釋后加入抗體包被孔；
2. 孵育（30min, 25℃），洗板后加底物顯色；
3. 酶標(biāo)儀（450nm）測吸光度，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線計算濃度；
判定：吸光度與毒素濃度負(fù)相關(guān)，顯色越淺毒素越高。

四、國際與國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)對比

參數(shù)	中國（GB 2763-2021）	日本（厚生省）	歐盟（EC 853/2004）
TTX限值 ≤10 μg/kg（可食部位）	不得檢出（全魚禁用）	禁止銷售含TTX水產(chǎn)品
檢測方法推薦LC-MS/MS	小鼠生物測定法+LC-MS確認(rèn)	LC-MS/MS為主

五、檢測設(shè)備與試劑

設(shè)備/試劑	用途	推薦型號/品牌
液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀	高精度TTX定量	Thermo Scientific TSQ Altis
酶標(biāo)儀	ELISA快速篩查	BioTek Synergy H1
固相萃取裝置	樣本凈化	Agilent Bond Elut C18
TTX標(biāo)準(zhǔn)品	定量校準(zhǔn)	Sigma-Aldrich（≥98%純度）

六、注意事項與應(yīng)急處理

安全防護(hù)：
- 實(shí)驗人員穿戴防護(hù)服、手套及護(hù)目鏡；
- 廢棄樣本需經(jīng)121℃高壓滅菌30分鐘。
中毒急救：
- 癥狀：麻木、呼吸困難、血壓下降；
- 處理：立即催吐+活性炭吸附，送醫(yī)使用呼吸機(jī)支持；
- 解毒劑：無特效藥，對癥治療為主。

通過系統(tǒng)化檢測，可有效預(yù)防河豚毒素中毒事件，保障食品安全。建議水產(chǎn)加工企業(yè)加強(qiáng)原料篩查（ELISA初篩+LC-MS/MS確證），監(jiān)管部門定期抽檢，并嚴(yán)格遵循“河豚魚加工資質(zhì)”準(zhǔn)入制度（僅允許養(yǎng)殖紅鰭東方鲀和暗紋東方鲀加工后銷售）。