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抗性淀粉檢測

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發(fā)布時(shí)間：2025-03-10 14:45:29 更新時(shí)間：2025-03-09 14:47:44

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

抗性淀粉（Resistant Starch, RS）的檢測需通過模擬人體消化過程，區(qū)分可消化淀粉與抗性淀粉，并結(jié)合 酶解法 和 分光光度法 定量分析。以下是基于 AOAC 2002.02 和 GB 5009.88-2023 的系統(tǒng)化檢測方案：

一、檢測原理

抗性淀粉在小腸中不被消化，需通過以下步驟分離測定：

模擬消化：用胰酶和淀粉葡萄糖苷酶水解可消化淀粉。
離心分離：保留未水解的RS，洗滌后酸解為葡萄糖。
定量分析：葡萄糖氧化酶法（GOPOD）測定葡萄糖含量，換算為RS占比。

二、檢測設(shè)備與試劑

項(xiàng)目	設(shè)備/試劑	關(guān)鍵參數(shù)
酶解反應(yīng)	恒溫水浴搖床（37±1℃）	振蕩頻率100 rpm
離心分離	高速離心機(jī)（≥10,000×g）	轉(zhuǎn)子適配50mL離心管
酸水解	耐高溫水解管（耐壓）	121℃高壓滅菌條件
葡萄糖測定	分光光度計(jì)（510nm）	精度±0.001Abs
關(guān)鍵試劑	- 胰酶（P-7545, Sigma）	活性≥8 USP units/mg
	- 淀粉葡萄糖苷酶（A-7095, Sigma）	活性≥260 U/mL
	- GOPOD試劑盒（K-GLUC, Megazyme）	含葡萄糖氧化酶與過氧化物酶

三、操作步驟

1. 樣品預(yù)處理

粉碎與脫脂：樣品過80目篩，石油醚脫脂（脂肪含量≤1%）。
水分測定：105℃烘干法測定水分，用于結(jié)果校正。

2. 模擬消化

配制消化液：
- 胰酶溶液：0.1g胰酶 + 20mL 0.1M磷酸鹽緩沖液（pH6.9）。
- 淀粉葡萄糖苷酶溶液：0.1mL酶液 + 4.9mL緩沖液。
酶解反應(yīng)：
- 取100mg樣品 + 10mL胰酶溶液 → 37℃振蕩2h。
- 加入5mL淀粉葡萄糖苷酶溶液 → 繼續(xù)振蕩4h。

3. 分離抗性淀粉

離心沉淀：10,000×g離心10min，棄上清（含可消化淀粉）。
洗滌殘?jiān)?/strong>：用80%乙醇洗滌沉淀3次，去除游離糖。

4. 酸水解與測定

酸水解：

沉淀 + 10mL 2M KOH → 冰浴攪拌30min。

加入10mL 1.2M醋酸鈉緩沖液（pH3.8） → 121℃高壓水解30min。

葡萄糖測定：

水解液稀釋后加入GOPOD試劑 → 37℃反應(yīng)20min → 測510nm吸光度。

標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算葡萄糖含量，乘以0.9（淀粉與葡萄糖轉(zhuǎn)換系數(shù)）。

5. 結(jié)果計(jì)算

抗性淀粉含量(%)=葡萄糖質(zhì)量×0.9樣品干重×100抗性淀粉含量(%)=樣品干重葡萄糖質(zhì)量×0.9?×100

四、注意事項(xiàng)與優(yōu)化

酶活性驗(yàn)證：定期校準(zhǔn)酶活力，避免酶失活導(dǎo)致假陽性。

洗滌徹底性：乙醇洗滌不充分會(huì)殘留可溶性糖，干擾結(jié)果。

樣品類型調(diào)整：

高直鏈淀粉（如RS2型）：延長酶解時(shí)間至6h。

加工食品（如餅干）：需額外去除添加糖（如蔗糖）干擾。

五、標(biāo)準(zhǔn)方法對比

標(biāo)準(zhǔn)方法 適用范圍 檢測時(shí)間 精度（RSD）

AOAC 2002.02 谷物、豆類、加工食品 8-10h ≤5%

Megazyme試劑盒 快速檢測（RS1-RS4型） 4-6h ≤3%

GB 5009.88-2023 國內(nèi)食品（需酸水解改進(jìn)） 10-12h ≤7%

六、應(yīng)用場景

食品營養(yǎng)標(biāo)簽：標(biāo)注RS含量（如高抗性淀粉大米R(shí)S≥10%）。

功能食品研發(fā)：優(yōu)化配方提升RS含量（如添加RS4型改性淀粉）。

質(zhì)量控制：監(jiān)控加工工藝（如濕熱處理對RS3型的影響）。

通過標(biāo)準(zhǔn)化檢測，可精準(zhǔn)評估抗性淀粉的健康價(jià)值與工藝適用性。建議結(jié)合 DSC（差示掃描量熱法） 分析淀粉糊化特性，或 體外發(fā)酵模型 評估RS的益生元效應(yīng)，形成多維數(shù)據(jù)支撐。

檢測機(jī)構(gòu)資質(zhì)證書

CMA認(rèn)證
檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定證書

證書編號(hào)：241520345370

有效期至：2030年4月15日

CNAS認(rèn)可
實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可證書

證書編號(hào)：CNAS L22006

有效期至：2030年12月1日

ISO認(rèn)證
質(zhì)量管理體系認(rèn)證證書

證書編號(hào)：ISO9001-2024001

有效期至：2027年12月31日

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標(biāo)準(zhǔn)方法	適用范圍	檢測時(shí)間	精度（RSD）
AOAC 2002.02	谷物、豆類、加工食品	8-10h	≤5%
Megazyme試劑盒	快速檢測（RS1-RS4型）	4-6h	≤3%
GB 5009.88-2023	國內(nèi)食品（需酸水解改進(jìn)）	10-12h	≤7%

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抗性淀粉檢測

一、檢測原理

二、檢測設(shè)備與試劑

三、操作步驟

1. 樣品預(yù)處理

2. 模擬消化

3. 分離抗性淀粉

4. 酸水解與測定

5. 結(jié)果計(jì)算

四、注意事項(xiàng)與優(yōu)化

五、標(biāo)準(zhǔn)方法對比

六、應(yīng)用場景

檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定證書

實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可證書

質(zhì)量管理體系認(rèn)證證書

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二、檢測設(shè)備與試劑

三、操作步驟

四、注意事項(xiàng)與優(yōu)化

五、標(biāo)準(zhǔn)方法對比

六、應(yīng)用場景