您現(xiàn)在的位置：首頁 > 檢測項(xiàng)目 > 其他檢測

蘆丁檢測

1對1客服專屬服務(wù)，免費(fèi)制定檢測方案，15分鐘極速響應(yīng)

可選形式：電子報(bào)告紙質(zhì)報(bào)告

可選語言：中文報(bào)告英文報(bào)告

發(fā)布時(shí)間：2025-03-10 09:21:18 更新時(shí)間：2025-03-09 09:22:55

點(diǎn)擊：0

作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

蘆?。≧utin）是一種廣泛存在于植物中的黃酮類化合物，其含量檢測對藥品、食品及保健品質(zhì)量控制至關(guān)重要。本文系統(tǒng)解析蘆丁檢測的核心方法、國際標(biāo)準(zhǔn)（如中國藥典、USP、AOAC）及關(guān)鍵注意事項(xiàng)，提供從樣品前處理到數(shù)據(jù)分析的全流程技術(shù)指南。

一、核心檢測方法與標(biāo)準(zhǔn)對照

1. 高效液相色譜法（HPLC）

參數(shù)	條件設(shè)置	標(biāo)準(zhǔn)要求
色譜柱	C18反相柱（250mm×4.6mm，5μm）	理論塔板數(shù)≥5000
流動(dòng)相	甲醇-0.1%磷酸水溶液（40:60，v/v）	梯度洗脫或等度洗脫
檢測波長	360nm（蘆丁最大吸收峰）	峰面積RSD≤2.0%
流速	1.0mL/min	保留時(shí)間偏差≤±2%
標(biāo)準(zhǔn)曲線	蘆丁對照品（純度≥98%）0.01-0.5mg/mL	線性相關(guān)系數(shù)R²≥0.999

操作流程：

樣品前處理：植物粉末（如槐米）用70%乙醇超聲提取30min，離心過濾；
進(jìn)樣分析：進(jìn)樣量10μL，記錄峰面積；
定量計(jì)算：外標(biāo)法計(jì)算蘆丁含量（mg/g）。

適用標(biāo)準(zhǔn)：中國藥典2020版一部（槐花項(xiàng)下）、AOAC 999.12。

2. 紫外-可見分光光度法（UV-Vis）

參數(shù)	條件設(shè)置
檢測波長	510nm（蘆丁-三氯化鋁絡(luò)合物最大吸收）
顯色反應(yīng)	蘆丁與AlCl?生成黃色絡(luò)合物（1:1配位）
標(biāo)準(zhǔn)曲線	蘆丁對照品0.02-0.20mg/mL

操作流程：

顯色反應(yīng)：取1mL樣品液 + 1mL 5% AlCl?乙醇溶液，避光靜置10min；
吸光度測定：以試劑空白調(diào)零，測510nm處吸光度；
計(jì)算含量：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算濃度。

優(yōu)缺點(diǎn)：

優(yōu)點(diǎn)：設(shè)備成本低，操作簡便；
缺點(diǎn)：易受其他黃酮類物質(zhì)干擾（如槲皮素），特異性較低。

適用標(biāo)準(zhǔn)：GB/T 22244-2008（保健食品中總黃酮測定）。

3. 薄層色譜掃描法（TLC-Scanning）

參數(shù)	條件設(shè)置
薄層板	硅膠G板（20×20cm）
展開劑	乙酸乙酯-甲酸-水（8:1:1，v/v/v）
顯色劑	1% FeCl?乙醇溶液
掃描波長	反射法，λ=365nm

操作流程：

點(diǎn)樣：樣品與對照品點(diǎn)樣于薄層板，點(diǎn)樣量2μL；
展開：上行展開至前沿10cm，晾干；
顯色與掃描：噴顯色劑，掃描斑點(diǎn)積分面積定量。

適用場景：快速篩查與半定量分析，適用于實(shí)驗(yàn)室初步檢測。

二、關(guān)鍵設(shè)備與試劑

設(shè)備/試劑	推薦型號/規(guī)格	用途
高效液相色譜儀	Agilent 1260 Infinity II（DAD檢測器）	HPLC定量分析
紫外分光光度計(jì)	Shimadzu UV-2600（波長范圍190-900nm）	UV-Vis法測定吸光度
薄層掃描儀	CAMAG TLC Scanner 4	TLC斑點(diǎn)定量
蘆丁對照品	Sigma-Aldrich（貨號R5143，純度≥98%）	標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
甲醇（色譜純）	Fisher Chemical（貨號A452-4）	流動(dòng)相配制

三、方法驗(yàn)證與質(zhì)控要點(diǎn)

1. 方法驗(yàn)證參數(shù)

項(xiàng)目	要求
線性范圍	0.01-0.5mg/mL，R²≥0.999
精密度（RSD）	日內(nèi)/日間RSD≤3.0%
回收率	加標(biāo)回收率95%-105%
檢測限（LOD）	≤0.005mg/mL（HPLC法）

2. 干擾物質(zhì)排除

HPLC法：通過色譜峰分離度（≥1.5）排除槲皮素、異槲皮苷等干擾；
UV-Vis法：加入掩蔽劑（如EDTA）絡(luò)合金屬離子干擾。

四、行業(yè)應(yīng)用案例

1. 槐米提取物質(zhì)量控制

檢測方法：HPLC法（中國藥典）；
驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)：槐米中蘆丁含量≥20%（干燥品計(jì)）。

2. 蕎麥茶總黃酮測定

檢測方法：UV-Vis法（GB/T 22244）；
驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)：總黃酮（以蘆丁計(jì)）≥1.5mg/g。

五、常見問題與解決方案

問題現(xiàn)象	原因分析	解決方案
HPLC峰拖尾	色譜柱污染或流動(dòng)相pH不當(dāng)	沖洗色譜柱，調(diào)節(jié)流動(dòng)相pH至2.5-3.0
UV法吸光度過高	顯色時(shí)間過長或AlCl?濃度過高	控制顯色時(shí)間10min，校準(zhǔn)試劑濃度
TLC斑點(diǎn)擴(kuò)散	環(huán)境濕度過高或展開劑比例不當(dāng)	使用干燥劑控制濕度，優(yōu)化展開劑配比

六、創(chuàng)新技術(shù)趨勢

UHPLC聯(lián)用質(zhì)譜（UHPLC-MS）：
- 超高效液相色譜（2μm填料柱）縮短分析時(shí)間至5min內(nèi)；
- 質(zhì)譜檢測（MRM模式）提升靈敏度至pg級。
近紅外光譜（NIR）快速檢測：
- 結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)模型，實(shí)現(xiàn)蘆丁含量無損快檢（誤差≤5%）。

通過系統(tǒng)化檢測，可精準(zhǔn)評估植物原料與產(chǎn)品中的蘆丁含量。建議優(yōu)先選用HPLC法確保準(zhǔn)確性，并通過CNAS/CMA認(rèn)證實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證方法可靠性。