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肝硬化動物模型檢測

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發(fā)布時間：2024-05-21 08:15:32 更新時間：2025-06-09 16:28:22

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

　　選體重150-200g的Wistar大鼠，將D-氨基半乳糖配制成10%的生理鹽水溶液，用1NNaOH將pH調(diào)節(jié)至7.0,以250mg/kg的劑量行腹內(nèi)注射，每天一次，每周6天，約半年左右即可形成肝硬化。

　　在過程中，自股動脈取血作肝功能試驗，包括血清蛋白測定、濁度試驗、轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶(LDH)、單胺氧化酶(MAO)、5'-核苷酸酶(5'-NA)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)及膽堿酯酶。分批處死動物進行尸解，觀察腹水，心、肝、脾、肺腎等器官形態(tài),用4%甲醛溶液固定,石蠟包埋,切片厚5微米,進行HE、網(wǎng)狀纖維(Gordon與Sweet法)、膠原纖維(Van Gieson 法)及彈力纖維(Weiger法)染色。

　　在采用上述劑量D-氨基半乳糖長期多次注入大鼠腹腔時，動物耐受性較好。逐漸出現(xiàn)進食活動減少，有時解稀糖大便，腹部較為膨隆。半年內(nèi)與對照組相比，實驗組體重平均增長顯著延緩。

　　尸檢時可見腹腔內(nèi)有腹水，0-20ml不等。心、脾、肺、腎、無明顯改變。與對照組相比，早期肝明顯增大、重量增加，色澤較灰黃，以后體積逐漸縮小，質(zhì)地變硬，邊緣較鈍，肝表面可見彌漫性分布的細顆粒狀結(jié)節(jié)，結(jié)節(jié)大小不一，直徑約為0.5-1.5mm,結(jié)節(jié)間可見彌漫分布的纖維間隔，間隔一般較細小，其凹凸程度隨病變而加深。切片HE染色、光鏡下檢查，在注射氨基半乳糖5個月后，肝小葉結(jié)構(gòu)開始紊亂,形成大小不等的肝細胞團，有的仍見好的中央靜脈，但其周圍門脈區(qū)膽管上皮高度增生，其間夾有殘留的個別肝細胞及少量單核多核白細胞及褐色素沉著。隨著病程的延長，增生的膽管及纖維母細胞向四周呈星芒狀伸展，有的與中央靜脈相連。一般肝細胞變性壞死少見，大多呈增生表現(xiàn)。Gordon與Sweet 法染色顯示肝細胞團中網(wǎng)狀纖維少見而周圍組織中存在著大量疏松的網(wǎng)狀纖維。膠原纖維及彈性纖維均未見增多。除肝外，其余實質(zhì)器官切片無異常發(fā)現(xiàn)。

　　實驗動物在出現(xiàn)肝硬化時血清白蛋白含量稍有降低,濁度試驗略增高,血清GPT、LDH、MAO、5'-NA、γ-GT與膽堿脂酶均無明顯改變。