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miRNA前體甲基化測序

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發(fā)布時(shí)間：2024-05-21 08:15:32 更新時(shí)間：2025-02-18 14:34:20

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　　樣品類型細(xì)胞、組織或RNA，其他樣本類型及樣品量請電詢。樣品量a) 細(xì)胞：2107b) 組織：100 mg-1 gc) RNA：30-300 μg(OD260/280：1.6-2.3;RNA無明顯降解28S:18S>1.5或RIN>7)實(shí)驗(yàn)價(jià)格詳詢銷售人員。

服務(wù)項(xiàng)目：miRNA前體甲基化測序

MicroRNAs（miRNAs）是一類廣泛存在于真核生物中，長度為～22nt的單鏈小分子非編碼RNA，在轉(zhuǎn)錄后的基因調(diào)控中發(fā)揮作用。它們廣泛參與細(xì)胞增殖、凋亡、分化等生理過程。目前研究發(fā)現(xiàn)，miRNA能夠發(fā)生m6A甲基化修飾，不僅能夠改變其穩(wěn)定性，而且能改變與靶mRNA的識別及結(jié)合能力，調(diào)控mRNA降解或翻譯，在各種重大人類疾病中發(fā)揮關(guān)鍵的調(diào)控作用，并具有作為新型臨床分子標(biāo)志物的潛能。

焦磷酸測序.jpg

提取total RNA后，利用small RNA純化試劑盒提純small RNA（包括miRNA）；將m6A RNA甲基化特異性抗體與RNA進(jìn)行共孵育，抓取有甲基化修飾的片段進(jìn)行測序；同時(shí)需要平行測序一個(gè)對照（Input）樣本，對照樣本為未進(jìn)行IP反應(yīng)的RNA。對照樣本用于消除非特異性抓取甲基化片段的背景。對比免疫共沉淀IP樣本和Input樣本中的序列片段，將miRNA m6A甲基化修飾位點(diǎn)定位到轉(zhuǎn)錄組上，并計(jì)算樣本中miRNA m6A甲基化程度。

結(jié)果內(nèi)容：CpG位點(diǎn)定量檢測