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活性氧（O)檢測

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發(fā)布時間：2025-08-27 21:52:28 更新時間：2025-08-26 21:52:30

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作者：中科光析科學技術(shù)研究所檢測中心

活性氧（O）檢測項目

活性氧（Reactive Oxygen Species, ROS）是一類具有高反應活性的含氧分子或自由基，包括超氧陰離子、過氧化氫、羥基自由基等。它們在生物體內(nèi)參與多種生理和病理過程，如細胞信號傳導、免疫防御，但過量積累會導致氧化應激，與衰老、癌癥、神經(jīng)退行性疾病等密切相關(guān)。因此，準確檢測活性氧水平對于疾病診斷、藥物研發(fā)和健康評估具有重要意義。檢測項目通常涉及生物樣本（如血液、組織、細胞培養(yǎng)物）或環(huán)境樣品中活性氧的定量分析，旨在評估氧化應激狀態(tài)、抗氧化能力或相關(guān)代謝途徑的活性。

檢測儀器

活性氧檢測常用的儀器包括熒光顯微鏡、流式細胞儀、化學發(fā)光儀、分光光度計和電子順磁共振譜儀（EPR）。熒光顯微鏡適用于細胞水平原位觀察，通過特異性熒光探針（如DCFH-DA）可視化活性氧分布；流式細胞儀可高通量定量細胞群體中的活性氧水平；化學發(fā)光儀基于發(fā)光反應檢測低濃度活性氧，靈敏度高；分光光度計用于比色法測定，操作簡便且成本較低；電子順磁共振譜儀則直接檢測自由基，提供高特異性但設(shè)備昂貴。此外，高效液相色譜（HPLC）和質(zhì)譜儀也可用于衍生化產(chǎn)物的分析，提高檢測準確性。

檢測方法

活性氧檢測方法多樣，主要包括熒光探針法、化學發(fā)光法、比色法、電子順磁共振法和酶學法。熒光探針法使用DCFH-DA、DHE等探針，在活性氧作用下產(chǎn)生熒光，通過測量熒光強度定量；化學發(fā)光法利用魯米諾或光澤精等底物，在氧化反應中發(fā)光，適用于實時監(jiān)測；比色法基于NBT還原或TBA反應生成有色產(chǎn)物，用分光光度計讀取吸光度；電子順磁共振法通過捕獲劑（如DMPO）穩(wěn)定自由基，直接檢測信號；酶學法使用特異性酶（如超氧化物歧化酶）抑制或催化反應，間接計算活性氧水平。選擇方法時需考慮樣本類型、靈敏度要求和設(shè)備可用性。

檢測標準

活性氧檢測遵循多個國際和行業(yè)標準，以確保結(jié)果可靠和可比性。常見標準包括ISO 21427-1（水質(zhì)檢測中活性氧的化學發(fā)光法）、ASTM E2148（生物樣本中氧化應激評估指南）和CLSI指南（臨床實驗室規(guī)范）。這些標準規(guī)定了樣本處理、試劑純度、校準曲線建立、質(zhì)量控制（如使用陽性對照和空白對照）以及數(shù)據(jù)解讀的規(guī)范。此外，研究領(lǐng)域常參考期刊協(xié)議（如《Free Radical Biology and Medicine》的推薦方法），強調(diào)重復性、線性范圍和檢測限的驗證。實驗室應實施標準化操作程序（SOP），并定期進行儀器校準和人員培訓，以最小化誤差。