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有機及無機成份定性定量-分光光度法檢測

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發(fā)布時間：2025-08-27 17:15:45 更新時間：2025-08-26 17:15:47

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

有機及無機成份定性定量-分光光度法檢測

分光光度法是一種基于物質(zhì)對特定波長光的吸收特性來進行定性分析和定量測定的常用分析方法。該方法利用分光光度計測量樣品溶液對不同波長光的吸收程度，從而推斷樣品中有機或無機成分的存在及其濃度。分光光度法因其操作簡便、靈敏度高、選擇性好、成本較低等優(yōu)點，廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測、食品分析、醫(yī)藥研發(fā)、化工生產(chǎn)等領(lǐng)域。在有機成分檢測中，常用于測定如蛋白質(zhì)、核酸、維生素、農(nóng)藥殘留等；在無機成分檢測中，常用于金屬離子（如鐵、銅、鋅）、陰離子（如硝酸鹽、磷酸鹽）等的分析。該方法的基本原理是比爾-朗伯定律，即吸光度與溶液濃度和光程長度成正比，通過標準曲線法或標準加入法實現(xiàn)定量分析。在實際應(yīng)用中，需注意樣品前處理、干擾消除和儀器校準等環(huán)節(jié)，以確保結(jié)果的準確性和可靠性。

檢測項目

分光光度法可用于多種有機和無機成分的定性及定量檢測。常見檢測項目包括：有機成分如蛋白質(zhì)（通過 Bradford 或 Lowry 法）、核酸（DNA/RNA 濃度）、維生素（如維生素 C 和 B 族）、農(nóng)藥殘留（如有機磷和氨基甲酸酯類）；無機成分如金屬離子（鐵、銅、鋅、鉛等，通過絡(luò)合反應(yīng)顯色）、陰離子（硝酸鹽、亞硝酸鹽、磷酸鹽等）。此外，還可用于水質(zhì)分析中的化學(xué)需氧量（COD）和生化需氧量（BOD）測定，以及食品中的添加劑和污染物檢測。每個項目通常基于特定化學(xué)反應(yīng)生成有色化合物，其吸光度與濃度相關(guān)。

檢測儀器

分光光度法是依賴專用儀器進行的，主要設(shè)備為分光光度計。常見的類型包括紫外-可見分光光度計（UV-Vis spectrophotometer），用于測量在紫外和可見光區(qū)域（通常190-800 nm）的吸收；以及紅外分光光度計，用于有機官能團分析。儀器關(guān)鍵部件包括光源、單色器（用于選擇特定波長）、樣品室、檢測器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)?，F(xiàn)代分光光度計 often 配備自動進樣器、溫控單元和軟件，支持多波長掃描和定量計算。使用時需定期校準儀器，例如使用空白溶液和標準溶液進行基線校正和標準曲線建立，以確保測量精度。維護方面，注意清潔比色皿、避免氣泡和雜質(zhì)干擾。

檢測方法

分光光度法的檢測方法通常包括樣品制備、反應(yīng)顯色、測量吸光度和數(shù)據(jù)分析步驟。首先，進行樣品前處理，如稀釋、過濾或萃取，以去除干擾物并制備合適濃度的溶液。對于有機成分， often 添加顯色劑（如考馬斯亮藍用于蛋白質(zhì)）發(fā)生反應(yīng)生成有色產(chǎn)物；對于無機成分，可能使用絡(luò)合劑（如鄰菲啰啉用于鐵離子）形成有色絡(luò)合物。然后，將樣品溶液裝入比色皿，置于分光光度計中，在特定波長下測量吸光度。定量分析時，通過繪制標準曲線（使用已知濃度標準品）計算未知樣品的濃度。方法需優(yōu)化參數(shù)如pH、反應(yīng)時間和溫度，以提高靈敏度和準確性。常見方法有直接法、差示分光光度法和導(dǎo)數(shù)分光光度法，以處理復(fù)雜樣品矩陣。

檢測標準

分光光度法的應(yīng)用需遵循相關(guān)國家和國際標準，以確保結(jié)果的可比性和合規(guī)性。常見標準包括中國國家標準（GB）、國際標準化組織（ISO）和美國材料與試驗協(xié)會（ASTM）標準。例如，GB/T 5009.系列用于食品中有機成分檢測，ISO 7887 用于水質(zhì)中鉻的測定，ASTM D1688 用于銅的檢測。標準通常規(guī)定樣品處理程序、試劑純度、波長選擇、校準方法和結(jié)果計算格式。實驗室應(yīng)通過質(zhì)量控制措施，如使用參考物質(zhì)、進行空白試驗和重復(fù)測定，來驗證方法的準確度和精密度。此外，儀器需定期進行性能驗證，例如波長準確性和吸光度線性檢查，以符合標準要求。