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紫外-可見光吸收光譜檢測

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發(fā)布時間：2025-07-31 07:32:13 更新時間：2025-07-30 07:32:13

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作者：中科光析科學技術研究所檢測中心

紫外-可見光吸收光譜檢測概述

紫外-可見光吸收光譜檢測（UV-Vis Spectroscopy）是分析化學領域的核心技術之一，其原理基于物質在紫外（200-400 nm）和可見光（400-800 nm）波段對特定波長光的選擇性吸收。當入射光穿過待測樣品時，分子中的電子發(fā)生能級躍遷，吸收特定波長的光子，形成特征吸收光譜。該方法具備高靈敏度（可檢測10?? mol/L濃度）、操作便捷、分析速度快等優(yōu)勢，廣泛應用于藥物純度分析、環(huán)境污染物監(jiān)測、生化反應動力學研究以及材料科學中的納米粒子表征等領域。其非破壞性特質尤其適合珍貴樣本的連續(xù)檢測，是現代實驗室不可或缺的分析工具。

檢測項目

紫外-可見光吸收光譜可執(zhí)行多種關鍵檢測任務，主要包括：1）濃度定量分析，如蛋白質（通過280 nm處酪氨酸吸收）或核酸（260 nm處堿基吸收）的定量測定；2）純度驗證，例如藥物中雜質峰的識別；3）化學結構分析，通過特征吸收峰鑒定共軛體系或發(fā)色團；4）反應進程監(jiān)控，如酶催化反應的實時跟蹤；5）絡合物配位研究，通過配體場吸收帶分析金屬配合物結構。在環(huán)保領域，還可用于水體COD（化學需氧量）的快速評估。

檢測儀器

核心檢測儀器為紫外-可見分光光度計，主要由以下模塊構成：氘燈（紫外光源）與鎢燈（可見光源）組成的雙光源系統(tǒng)，光柵或棱鏡單色器（波長分辨率達0.1 nm），石英或玻璃樣品池（光程常為1 cm），光電倍增管或CCD檢測器。現代儀器多配備溫控樣品室（±0.1℃精度）和自動進樣器，如安捷倫Cary系列、島津UV-2600等高端機型支持雙光束設計，可實時扣除溶劑背景干擾，大幅提升數據準確性。

檢測方法

標準檢測流程包含四個關鍵步驟：1）樣品制備，需將待測物溶解于特定溶劑（如超純水、甲醇），濃度調整至吸光度0.2-1.0區(qū)間；2）基線校正，使用空白溶劑進行全波段掃描（通常200-800 nm）；3）光譜采集，以1 nm步進記錄吸光度，重點觀測特征峰位置（λ_max）及峰形；4）數據分析，依據朗伯-比爾定律A=εlc（A為吸光度，ε為摩爾吸光系數，l為光程，c為濃度）進行定量計算。對于復雜體系，常結合導數光譜或多元校正法消除基質干擾。

檢測標準

該技術遵循嚴格的國際與行業(yè)標準，主要包括：1）藥典標準，如《美國藥典》USP ?857? 和《中國藥典》2020版通則0401規(guī)定溶出度測試方法；2）環(huán)境標準，參照ISO 7887:2011水質色度測定法；3）材料表征標準，依據ASTM E275-08描述儀器性能驗證規(guī)范。關鍵質控指標涵蓋波長精度（±0.3 nm）、吸光度線性（R2>0.999）及雜散光（<0.05% T）。定期需使用鈥玻璃濾光片或重鉻酸鉀溶液進行儀器校準，確保數據符合GLP實驗室要求。