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Rh檢測

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發(fā)布時間：2025-07-29 11:41:00 更新時間：2025-07-28 11:41:01

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作者：中科光析科學技術研究所檢測中心

Rh檢測：保障輸血安全與妊娠健康的關鍵環(huán)節(jié)

Rh血型系統(tǒng)，尤其是D抗原（Rh因子）的檢測，是現(xiàn)代臨床醫(yī)學中一項至關重要的實驗室檢查項目。它是繼ABO血型系統(tǒng)之后，對人類輸血安全、妊娠管理及新生兒健康影響最大的紅細胞血型系統(tǒng)。Rh陰性個體（缺乏D抗原）在接受Rh陽性血液或妊娠期間若胎兒為Rh陽性，可能產(chǎn)生抗-D抗體，導致嚴重的溶血性輸血反應或新生兒溶血病（HDN）。因此，準確、靈敏、特異地檢測Rh(D)抗原狀態(tài)是臨床實驗室的核心任務之一，直接關系到患者的生命安全和生育健康。其檢測范圍不僅限于常規(guī)的Rh(D)定型，還包括對弱D型、部分D型等變異型的鑒別，以及對已產(chǎn)生抗-D抗體患者的監(jiān)測和效價測定。

檢測項目

Rh檢測的核心項目主要包括：

Rh(D)定型： 這是最基本且最重要的檢測項目，用于確定個體紅細胞表面是否存在D抗原，將其分類為Rh陽性或Rh陰性。
弱D型檢測： 當常規(guī)方法檢測為陰性或弱陽性時，需進一步采用更敏感的方法（如抗人球蛋白試驗）確認是否為弱D型（Du型）。弱D型個體作為供血者時，其血液通常視為Rh陽性；作為受血者時，弱D型個體通常視作Rh陰性處理，需要輸注Rh陰性血。
部分D型檢測： 使用針對不同D抗原表位的單克隆抗體組合進行檢測，以識別D抗原結構存在部分缺失的個體，這類個體有產(chǎn)生抗-D抗體的風險。
Rh表型（C, c, E, e抗原）檢測： 在特定情況下（如多次輸血患者、有生育史或有輸血反應史的患者、抗體鑒定需要），需進行除D抗原外的其他主要Rh抗原（C, c, E, e）的檢測。
抗-D抗體篩查與鑒定： 對Rh陰性個體（尤其是育齡期女性）或有輸血/妊娠史的個體進行血清學檢查，檢測是否存在抗-D抗體。
抗-D抗體效價測定： 對于已檢出的抗-D抗體孕婦，需定期監(jiān)測抗體效價，評估胎兒發(fā)生溶血的風險。

檢測儀器

現(xiàn)代Rh血型檢測主要依賴以下儀器設備，實現(xiàn)自動化、標準化和高通量檢測，提高準確性和效率：

全自動血型分析儀： 這是大型實驗室的主流設備?？勺詣踊瓿蓸颖痉峙?、試劑添加、孵育、離心、結果判讀（通常采用圖像分析技術）和報告生成全過程。如瑞士達亞美（DiaMed）的ID系列、美國強生（Ortho）的AutoVue系列等。
微柱凝膠卡離心機/孵育器/判讀系統(tǒng)： 基于微柱凝膠免疫檢測技術（如DiaMed的ID卡、Bio-Rad的DG Gel卡）。專用離心機進行離心操作，判讀系統(tǒng)或肉眼判讀凝膠柱內紅細胞凝集情況。
血型血清學專用離心機： 用于試管法、玻片法的離心步驟，需配備精確的轉速和時間控制。
顯微鏡： 用于觀察玻片法或試管法中細微的凝集反應。
恒溫水浴箱/孵育箱： 為某些檢測方法（如抗人球蛋白試驗）提供恒定的孵育溫度。
酶標儀/洗板機（用于某些ELISA法試劑盒）： 部分試劑采用酶聯(lián)免疫吸附法進行Rh分型或抗體檢測。

檢測方法

Rh血型檢測主要采用經(jīng)典的血清學方法：

玻片法： 最簡單快捷，但靈敏度和特異性相對較低，易受環(huán)境溫度、反應時間、判讀主觀性影響。通常僅用于初步篩查或緊急情況下的Rh(D)定型，不適合弱D檢測和抗體篩查。操作：在玻片上混合紅細胞懸液與抗-D血清，觀察是否出現(xiàn)肉眼可見的凝集。
試管法： 經(jīng)典的標準方法，靈敏度高于玻片法。可靈活選擇鹽水介質法（檢測IgM型抗體/抗原）或添加增強劑（如牛血清白蛋白、低離子強度鹽水LISS、聚乙二醇PEG）的方法（檢測IgG型抗體/抗原）。結果判讀需離心后肉眼或顯微鏡觀察?？谷饲虻鞍自囼灒–oombs試驗）是試管法的關鍵延伸，用于檢測弱D型、不規(guī)則抗體篩查/鑒定及交叉配血。
微柱凝膠免疫檢測技術： 目前最主流和最可靠的方法。將抗血清包被在微柱凝膠卡的反應腔內，加入紅細胞懸液，離心后根據(jù)紅細胞在凝膠中的位置判讀結果（凝集紅細胞留在凝膠上層或中間，未凝集細胞沉降至凝膠底部）。該技術靈敏度高、特異性好、結果判讀客觀清晰、易于標準化和自動化，可同時用于抗原定型和抗體檢測（直接/間接抗人球蛋白試驗原理）。
固相紅細胞吸附技術： 在微孔板孔底包被抗人球蛋白（用于抗體檢測）或特異性抗原（用于抗原定型），通過觀察紅細胞在孔底的吸附模式（棋盤狀凝集）來判讀結果。
分子生物學方法（基因分型）： 通過PCR技術檢測RHD基因的存在、缺失或變異。主要用于解決復雜的血清學問題（如弱D、部分D、DEL型的精確分型）、預測胎兒Rh血型（無創(chuàng)產(chǎn)前診斷）、大量供者庫Rh分型的快速篩查、以及血清學方法無法確定的Rh陰性個體的確認。目前主要作為血清學檢測的補充手段。

檢測標準

Rh血型檢測必須遵循嚴格的國家、行業(yè)和國際標準及規(guī)范，確保檢測結果的準確性、可靠性和可比性：

國際標準：
- 國際輸血協(xié)會（ISBT）：制定紅細胞血型系統(tǒng)的命名、抗原編號和技術指南。
- 美國血庫協(xié)會（AABB）：《血庫和輸血服務機構標準》是國際輸血領域最具影響力的標準之一，對Rh檢測的各個方面（試劑、方法、質控、人員、記錄）都有詳盡規(guī)定。
- 世界衛(wèi)生組織（WHO）：提供血液安全相關指南和建議。
國內標準（中華人民共和國）：
- 強制性國家標準（GB）：如《全血及成分血質量要求》（GB 18469）對血液Rh(D)定型有明確規(guī)定。
- 衛(wèi)生行業(yè)標準（WS/T）：如《輸血醫(yī)學常用術語》（WS/T 203）、《紅細胞血型抗體鑒定技術指南》（WS/T 795）等。
- 中國合格評定國家認可委員會（CNAS）：ISO 15189《醫(yī)學實驗室質量和能力的要求》是實驗室質量管理體系的國際通用標準，國內實驗室常依據(jù)此標準進行認可。
- 國家藥典委員會：《中華人民共和國藥典》對血液制品相關檢測有規(guī)定。
核心要求：
- 試劑要求： 使用國家批準文號的合格試劑。抗-D血清需有足夠的效價和親和力，使用多克隆抗體或混合的單克隆抗體（覆蓋多個D抗原表位）。需有明確的陰陽性對照。
- 操作規(guī)程（SOP）： 實驗室必須制定詳細、可操作的標準化程序文件。
- 室內質控（IQC）： 每次檢測或每批檢測必須使用已知結果的陰性和陽性（包括弱陽性/弱D）對照樣本進行監(jiān)控，確保檢測系統(tǒng)正常。
- 室間質評（EQA）： 定期參加國家級或省級臨檢中心組織的室間質量評價活動，驗證實驗室檢測結果的準確性。
- 結果判讀： 必須有明確、統(tǒng)一的判讀標準（如凝集強度分級標準），重要結果（特別是Rh陰性/弱D）需由雙人或采用不同方法復核。
- 人員資質與培訓： 操作人員需具備相關專業(yè)背景，經(jīng)過嚴格培訓并考核合格。
- 記錄保存： 所有檢測過程、結果、質控數(shù)據(jù)必須完整、清晰、可追溯地記錄并保存規(guī)定年限。