傳染性造血器官壞死病檢疫檢測(cè)概述

傳染性造血器官壞死?。↖nfectious Hematopoietic Necrosis, IHNV）是一種嚴(yán)重危害鮭科魚類（如虹鱒、大西洋鮭等）的病毒性傳染病，由彈狀病毒科（Rhabdoviridae）的傳染性造血器官壞死病毒（IHNV）引發(fā)。該病具有高致死率（幼魚感染后死亡率可達(dá)90%以上）和高傳染性，可通過水體、卵、排泄物及受污染設(shè)備傳播。全球范圍內(nèi)，IHNV被列為水生動(dòng)物疫病防控重點(diǎn)，檢疫檢測(cè)是阻斷疫情擴(kuò)散、保障水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)安全的核心手段。

檢測(cè)項(xiàng)目

傳染性造血器官壞死病的檢測(cè)主要圍繞以下核心項(xiàng)目展開：

1. 病原檢測(cè)：直接檢測(cè)樣本中IHNV的存在，包括病毒分離培養(yǎng)、PCR核酸檢測(cè)及電鏡觀察。

2. 抗體檢測(cè)：通過ELISA或中和試驗(yàn)檢測(cè)魚類血清中特異性抗體，評(píng)估群體感染狀態(tài)。

3. 病理學(xué)觀察：針對(duì)病魚組織（如腎、脾、肝）進(jìn)行組織切片染色，觀察典型病理變化（如造血組織壞死）。

4. 種苗檢疫：對(duì)魚卵、幼體進(jìn)行病毒篩查，防止垂直傳播。

檢測(cè)儀器

檢測(cè)過程中需使用專業(yè)設(shè)備確保結(jié)果準(zhǔn)確性：

? PCR儀：用于病毒核酸擴(kuò)增及實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)（qPCR）。

? 超速離心機(jī)：病毒富集與純化。

? 細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)：EPC（虹鱒上皮細(xì)胞）或CHSE-214（大鱗大馬哈魚胚胎細(xì)胞）用于病毒分離。

? 酶標(biāo)儀：ELISA法抗體滴度測(cè)定。

? 熒光顯微鏡：免疫熒光標(biāo)記病毒觀察。

檢測(cè)方法

IHNV檢測(cè)需結(jié)合多種技術(shù)手段：

1. 樣本采集與處理
選取病魚內(nèi)臟（腎、脾）或體表黏液，勻漿后離心取上清液，分裝用于不同檢測(cè)。

2. PCR核酸檢測(cè)
采用特異性引物（如針對(duì)N基因或G基因）進(jìn)行RT-PCR，實(shí)時(shí)熒光定量PCR可量化病毒載量。檢測(cè)限可達(dá)10¹-10² TCID₅₀/ml。

3. 病毒分離培養(yǎng)
將樣本接種至敏感細(xì)胞系，觀察細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE），通常24-72小時(shí)內(nèi)可見細(xì)胞圓縮、脫落。

4. 血清學(xué)檢測(cè)
間接ELISA法檢測(cè)血清抗體，中和試驗(yàn)可驗(yàn)證抗體對(duì)病毒的中和能力。

5. 組織病理學(xué)分析
H&E染色觀察腎造血組織壞死、肝細(xì)胞空泡化等特征病變。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

國際與國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)IHNV檢測(cè)有嚴(yán)格規(guī)范：

? OIE標(biāo)準(zhǔn)：《水生動(dòng)物衛(wèi)生法典》要求采用病毒分離+PCR驗(yàn)證，或qPCR作為確診依據(jù)。

? 中國標(biāo)準(zhǔn)：GB/T 15805.2-2018規(guī)定RT-PCR檢測(cè)閾值（Ct≤35為陽性），并配套病毒分離金標(biāo)準(zhǔn)。

? 歐盟法規(guī)：2013/1090/EU要求進(jìn)出口鮭科魚類需提供IHNV陰性證明，檢測(cè)需經(jīng)OIE認(rèn)證實(shí)驗(yàn)室完成。

注意事項(xiàng)：檢測(cè)需在生物安全二級(jí)（BSL-2）實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，防止病毒擴(kuò)散；陽性樣本需按《動(dòng)物防疫法》進(jìn)行無害化處理。

檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)證書

CMA認(rèn)證

檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定證書

證書編號(hào)：241520345370

有效期至：2030年4月15日

CNAS認(rèn)可

實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可證書

證書編號(hào)：CNAS L22006

有效期至：2030年12月1日

ISO認(rèn)證

質(zhì)量管理體系認(rèn)證證書

證書編號(hào)：ISO9001-2024001

有效期至：2027年12月31日

關(guān)于我們

部分儀器

合作客戶