藍(lán)舌病VDT競(jìng)爭(zhēng)ELISA抗體檢測(cè)概述
藍(lán)舌?。˙luetongue Disease，BT）是由藍(lán)舌病病毒（BTV）引起的反芻動(dòng)物傳染病，主要通過(guò)媒介昆蟲(chóng)傳播，對(duì)畜牧業(yè)造成嚴(yán)重威脅。為有效監(jiān)測(cè)和防控藍(lán)舌病，抗體檢測(cè)技術(shù)成為關(guān)鍵手段。VDT（Virus Detection Technology）競(jìng)爭(zhēng)ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）是一種高效、特異性的抗體檢測(cè)方法，通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合原理，能夠快速識(shí)別動(dòng)物血清中的BTV特異性抗體，尤其適用于大規(guī)模血清學(xué)篩查。該技術(shù)具有靈敏度高、操作標(biāo)準(zhǔn)化、結(jié)果可量化等優(yōu)勢(shì)，現(xiàn)已成為國(guó)際通用的藍(lán)舌病抗體檢測(cè)方案之一。
檢測(cè)項(xiàng)目
VDT競(jìng)爭(zhēng)ELISA抗體檢測(cè)的核心目標(biāo)是檢測(cè)動(dòng)物血清中針對(duì)BTV的IgG抗體，具體包括以下內(nèi)容：
1. 抗體類(lèi)型檢測(cè)：針對(duì)BTV結(jié)構(gòu)蛋白（如VP7、VP2）的非結(jié)構(gòu)蛋白（如NS1、NS3）的抗體。
2. 血清樣本篩查：適用于牛、羊、鹿等易感動(dòng)物的血清或血漿樣本。
3. 感染狀態(tài)判定：通過(guò)抗體水平評(píng)估動(dòng)物是否曾感染或處于免疫狀態(tài)。
檢測(cè)儀器
該檢測(cè)需依賴(lài)以下關(guān)鍵儀器設(shè)備：
1. 酶標(biāo)儀：用于讀取微孔板在特定波長(zhǎng)（如450nm）下的吸光度值，需配備雙波長(zhǎng)校正功能。
2. 自動(dòng)洗板機(jī)：確保ELISA反應(yīng)孔在每一步洗滌中的均一性和徹底性。
3. 恒溫培養(yǎng)箱：控制反應(yīng)溫度（通常為37℃±1℃），保證抗原抗體結(jié)合穩(wěn)定性。
4. 微量移液器：精確加樣（量程覆蓋1μL-200μL）。
檢測(cè)方法
VDT競(jìng)爭(zhēng)ELISA的標(biāo)準(zhǔn)操作流程包括以下步驟：
1. 抗原包被：將BTV重組抗原固定在微孔板表面，4℃過(guò)夜。
2. 封閉處理：使用牛血清白蛋白（BSA）封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)。
3. 競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)：同時(shí)加入待測(cè)血清與酶標(biāo)單克隆抗體，未標(biāo)記抗體與標(biāo)記抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗原。
4. 顯色與終止：通過(guò)TMB底物顯色，硫酸終止反應(yīng)。
5. 結(jié)果判讀：計(jì)算抑制率（%）=（陰性對(duì)照OD值-樣本OD值）/陰性對(duì)照OD值×100%，通常以抑制率≥40%判為陽(yáng)性。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)
本檢測(cè)需嚴(yán)格遵循以下標(biāo)準(zhǔn)：
1. 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)：世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）《陸生動(dòng)物診斷試驗(yàn)和疫苗手冊(cè)》第3.1.3章相關(guān)規(guī)定。
2. 試劑盒認(rèn)證：使用經(jīng)OIE或本國(guó)獸醫(yī)主管部門(mén)認(rèn)證的商用試劑盒。
3. 質(zhì)量控制：每板須包含陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照和空白對(duì)照，CV值（變異系數(shù)）應(yīng)≤15%。
4. 結(jié)果驗(yàn)證：對(duì)陽(yáng)性樣本建議通過(guò)病毒中和試驗(yàn)（VNT）進(jìn)行復(fù)核。
通過(guò)上述標(biāo)準(zhǔn)化流程，VDT競(jìng)爭(zhēng)ELISA可在6小時(shí)內(nèi)完成96份樣本的高通量檢測(cè)，為藍(lán)舌病防控提供及時(shí)、可靠的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。
CMA認(rèn)證
檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定證書(shū)
證書(shū)編號(hào)：241520345370
有效期至：2030年4月15日
CNAS認(rèn)可
實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可證書(shū)
證書(shū)編號(hào)：CNAS L22006
有效期至：2030年12月1日
ISO認(rèn)證
質(zhì)量管理體系認(rèn)證證書(shū)
證書(shū)編號(hào)：ISO9001-2024001
有效期至：2027年12月31日
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