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斑節(jié)對蝦桿狀病毒病(MBV)檢疫檢測

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發(fā)布時間：2025-07-25 08:49:03 更新時間：2025-07-24 22:15:42

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

斑節(jié)對蝦桿狀病毒病(MBV)檢疫檢測概述

斑節(jié)對蝦桿狀病毒?。∕onodon Baculovirus Disease, MBV）是一種嚴(yán)重危害斑節(jié)對蝦（Penaeus monodon）的病毒性疾病，主要感染幼蝦和成蝦的中腸腺表皮細胞，導(dǎo)致攝食減少、生長停滯、死亡率升高等問題。該病毒通過垂直傳播（親蝦攜帶）或水平傳播（污染水體、飼料等）擴散，對全球?qū)ξr養(yǎng)殖業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失。由于其潛伏期長、感染初期癥狀不明顯，檢疫檢測成為防控MBV傳播的關(guān)鍵手段。目前，國際動物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為須申報的水生動物疫病，各國均制定了嚴(yán)格的檢疫標(biāo)準(zhǔn)和檢測流程。

檢測項目

MBV檢疫檢測的核心項目包括：
1. 病毒核酸檢測：通過分子生物學(xué)方法檢測病毒DNA；
2. 病理組織學(xué)檢查：觀察中腸腺細胞的核內(nèi)包涵體；
3. 病毒分離培養(yǎng)：利用對蝦細胞系或活體進行病毒擴增；
4. 免疫學(xué)檢測：采用ELISA或免疫熒光技術(shù)檢測病毒蛋白抗原。

檢測儀器

主要使用的儀器設(shè)備包括：
- PCR儀（用于核酸擴增）；
- 熒光顯微鏡（觀察病理切片和免疫熒光標(biāo)記）；
- 超高速離心機（病毒顆粒富集）；
- 電泳系統(tǒng)（核酸片段分析）；
- 電子顯微鏡（直接觀察病毒形態(tài)）。

檢測方法

1. 分子生物學(xué)檢測
采用PCR技術(shù)（如巢式PCR、實時熒光定量PCR）擴增MBV特異性基因片段（如DNA聚合酶基因），靈敏度可達1-10個病毒拷貝。
2. 病理學(xué)檢測
制備中腸腺組織切片，經(jīng)H&E染色后觀察核內(nèi)嗜堿性包涵體，結(jié)合電鏡確認(rèn)桿狀病毒顆粒。
3. 免疫學(xué)方法
利用單克隆抗體通過dot-blot ELISA或免疫組化技術(shù)檢測病毒抗原，適用于大規(guī)模篩查。

檢測標(biāo)準(zhǔn)

國際與國內(nèi)主要標(biāo)準(zhǔn)包括：
- OIE《水生動物衛(wèi)生法典》：規(guī)定MBV檢測需結(jié)合組織病理學(xué)和分子生物學(xué)方法；
- 中國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 34748-2017：明確PCR檢測的操作規(guī)范及判定閾值；
- SN/T 1675-2019：進出口對蝦中MBV的檢疫技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，涵蓋采樣、檢測及結(jié)果判定全流程。
檢測結(jié)果需滿足敏感性≥95%、特異性≥98%的技術(shù)要求，陽性樣本需經(jīng)實驗室復(fù)核確認(rèn)。