PrP-hApp/hPS1雙轉(zhuǎn)基因阿爾茲海默病小鼠模型。

品系名稱為：C57BL/6J-TgN（APP/PS1）ZLFILAS

背景品系為：C57BL/6J

啟動(dòng)子為：Mouse prion protein（PrP）

靶基因信息：（突變點(diǎn)）Mo/Hu APP Swedish mutations（K595N/M596L）+Hu PS1 deltaE9

構(gòu)建信息：

利用PrP-hAPP^K595N/M596L癡呆癥模型小鼠和PrP-hPS1^dE9癡呆癥模型小鼠雜交培育而成。所得新生小鼠1周內(nèi)剪鼠尾，提取基因組DNA，PCR鑒定APP/PS1轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的基因表型鑒定，其中APP 基因PCR產(chǎn)物長(zhǎng)344Kb，PS1基因PCR產(chǎn)物長(zhǎng)608 Kb，保留陽(yáng)性小鼠。

1、APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠表型的鑒定（圖1）。

圖1 1、2號(hào)為轉(zhuǎn)基因陰性小鼠，3、4、5、6、7、8號(hào)為APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性小鼠，9號(hào)為Marker。

 

2、病理學(xué)檢驗(yàn)

免疫組織化學(xué)選用 Aβ1-17 抗體(1:200) ，改良的 Bieschowsky 銀染法、Thioflavin-S熒光結(jié)果均顯示3 月齡動(dòng)物未檢測(cè)到明顯老年斑出現(xiàn)。4. 5月齡時(shí)APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性小鼠在大腦皮層出現(xiàn)老年斑，隨著月齡增加，大腦皮層老年斑數(shù)量體積明顯增加，9~12月齡小鼠大腦出現(xiàn)與阿爾茨海默病患者相似的老年斑。上述3種方法標(biāo)記老年斑效果一致（圖2）。

圖2 A、3月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠大腦海馬區(qū)抗Aβ1-17免疫組化染色（100×）；B、4月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠大腦皮層抗Aβ1-17免疫組化染色（100×）；C、4.5月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠大腦皮層抗Aβ1-17免疫組化染色（200×）；D、6月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠大腦海馬區(qū)抗Aβ1-17免疫組化染色（100×）；E、9月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠大腦皮層抗Aβ1-17免疫組化染色（200×）；F、12月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠大腦皮層抗Aβ1-17免疫組化染色（200×）；G、3月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠大腦Thioflavin-S熒光標(biāo)記結(jié)果（200×）；H、4.5月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠大腦皮層Thioflavin-S熒光標(biāo)記結(jié)果（200×）；I、6月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠大腦皮層Thioflavin-S熒光標(biāo)記結(jié)果（200×）；J、9月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠大腦皮層Thioflavin-S熒光標(biāo)記結(jié)果（200×）；K、12月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠大腦皮層Thioflavin-S熒光標(biāo)記結(jié)果（200×）；L、APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠大腦皮層Thioflavin-S熒光標(biāo)記結(jié)果（200×）；M、4.5月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠大腦皮層改良 Bielschowsky 銀染結(jié)果（200×）箭頭所指為老年斑；N、6月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠大腦皮層改良 Bielschowsky 銀染結(jié)果（200×）；O、9月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠大腦皮層改良 Bielschowsky 銀染結(jié)果（200×）；P、12月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠大腦皮層改良 Bielschowsky 銀染結(jié)果（200×）。

 

3、行為學(xué)結(jié)果

APP/PS1小鼠在3月齡出現(xiàn)認(rèn)知和行為學(xué)變化，Morris水迷宮試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)3、6 、9月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠空間探索實(shí)驗(yàn)結(jié)果與同月齡野生型小鼠相比有顯著差異，較同月齡野生型C57BL6J小鼠學(xué)習(xí)及記憶能力降低（P < 0. 05）（圖3) 。

圖3 Morris水迷宮第六天空間探索實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較

 

檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)證書(shū)

CMA認(rèn)證

檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定證書(shū)

證書(shū)編號(hào)：241520345370

有效期至：2030年4月15日

CNAS認(rèn)可

實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可證書(shū)

證書(shū)編號(hào)：CNAS L22006

有效期至：2030年12月1日

ISO認(rèn)證

質(zhì)量管理體系認(rèn)證證書(shū)

證書(shū)編號(hào)：ISO9001-2024001

有效期至：2027年12月31日

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