結直腸癌小鼠自發(fā)性模型
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發(fā)布時間:2025-07-25 08:49:03 更新時間:2025-07-25 08:13:07
點擊:72
作者:中科光析科學技術研究所檢測中心
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資源中文名稱 | 結直腸癌小鼠自發(fā)性模型 |
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資源英文名稱 | Mouse model for spontaneous colorectal cancer |
疾病概述 | 家族性腺瘤性息肉病(Familial Adenomatous Polyposis,F(xiàn)AP)是結直腸癌發(fā)生的癌前病變,患者結直腸部位多發(fā)成百上千個腺瘤性息肉,抑癌基因APC的突變是結直腸腫瘤的起始因素。Dove實驗室于1990年建立了C57BL/6J-APCmin/+小鼠品系,是在小鼠同源APC基因第850位點發(fā)生無義突變,造成其腸道多發(fā)腺瘤,被認為是一種良好的FAP小鼠模型。 |
實驗動物背景信息 |
APCMin/+小鼠發(fā)病機制是突變的基因產物,截短APC蛋白導致腸道上皮細胞胞質β-catenin蛋白的積累而后使其入核與TCF4/LEF轉錄因子結合啟動下游基因CyclinD 1等原癌基因的活化,但是其腺瘤發(fā)生、發(fā)展規(guī)律和其他生物學特性尚未探索清楚。 |
模型制作方法 |
包括實驗材料(實驗動物、試劑、儀器)、實驗環(huán)境、細胞培養(yǎng)/載體構建//蛋白表達/病原培養(yǎng)鑒定方法、實驗操作規(guī)程、動物處理倫理等內容。 APCMin/+小鼠,C57BL/6J小鼠,體重秤,清潔級動物房,手術剪,耳標,IVC籠盒,Co60照射的高脂飼料,PBND,蛋白酶K, promega GO TAQ Green Master Mix, takara 100bp DNA ladder, TBE緩沖液,亞甲藍,小鼠抗人β-catenin單克隆抗體(BD Trans-ductionLaboratorie,Cat,610154),小鼠抗人cyclinD 1(SantaCruz,Cat,sc-8396);二抗為過氧化辣根酶標記山羊抗小鼠IgG, DAB顯色液,蘇木精染液,顯微鏡,凝膠成像儀,甘油三酯試劑盒及總膽固醇試劑盒等。 實驗操作規(guī)程: APCMin/+雄性成年小鼠和C57雌性成年小鼠以1∶2的比例雜交,三個月后,其F1代中既有APCMin/+小鼠(腺瘤表型),又有C 57小鼠,進行全同胞兄妹交配,擴大種群。使用PCR方法對新生小鼠進行剪尾提取基因簽定。小鼠在正常飼養(yǎng)時或者高脂飼料飼養(yǎng)時均會出現(xiàn)腸道腫瘤,但是腫瘤數量,體積隨著飼養(yǎng)年齡增長而具有明顯差異。 |
動物模型的評價與驗證 | 該模型使用HE方法對APC min小鼠的小腸大腸部位進行病理評估,確認小鼠在小腸和大腸部位可以形成腺瘤,比較不同周齡小鼠的腺瘤數目和大小,發(fā)現(xiàn)腺瘤的發(fā)生發(fā)展規(guī)律。通過免疫組織化學染色方法確定β-catenin的表達量變化,進而助于闡明其發(fā)病機制。通過檢測24周齡小鼠的紅細胞數及血紅蛋白、總膽固醇及甘油三酯含量,發(fā)現(xiàn)隨著腺瘤數目和體積的增大對小鼠的影響。 |
保存方式 | 活體繁殖 |
更多相關 | 動物模型制備 |
證書編號:241520345370
證書編號:CNAS L22006
證書編號:ISO9001-2024001
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