C57BL/6J小鼠。

1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)C57BL/6 雄性小鼠由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物研究所提供。
2. 照射條件: ¹³⁷Cs γ 射線輻射源購(gòu)自加拿大原子能有限公司 (劑量率為0.76 Gy?min⁻¹), 小鼠接受全身一次性照射, 劑量為7.2Gy。
3. 觀察30天生存率 每日觀察小鼠一般狀況，稱(chēng)重；
4. 實(shí)驗(yàn)取材 照射 24 h 后頸椎脫臼處死小鼠, 取小腸組織, 依次用預(yù)冷PBS、10%中性福爾馬林沖洗內(nèi)容物。然后將小腸切成小段, 用醫(yī)用透氣膠帶成捆包扎, 固定, 24 h 后脫水并制作石蠟塊。
5.HE 染色和免疫組化實(shí)驗(yàn)小腸組織HE 染色采用傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)方法。鏡下通過(guò)形態(tài)學(xué)變化計(jì)數(shù)小腸隱窩內(nèi)凋亡細(xì)胞數(shù)量。小腸組織內(nèi)幾種蛋白表達(dá)檢測(cè)參考試劑說(shuō)明書(shū)采用免疫組化兩步法檢測(cè)。主要步驟: 脫蠟, 0.1 mol?L−1檸檬酸鹽95 ℃修復(fù)30 min, 10%過(guò)氧化氫室溫孵育10 min, 第一抗體4 ℃孵育過(guò)夜,第二抗體37 ℃孵育30 min, DAB 顯色, 蘇木素復(fù)染, 脫水封片。然后盲法鏡下計(jì)數(shù)每只小鼠50 個(gè)完整小腸隱窩陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。完整隱窩標(biāo)準(zhǔn): 切面在隱窩中心,可見(jiàn)清晰、完整的隱窩腔, 隱窩底部有4～6 個(gè)分泌細(xì)胞, 分泌細(xì)胞至隱窩頂部每側(cè)至少有10 個(gè)隱窩上皮細(xì)胞。
6. 數(shù)據(jù)處理 生存率用百分?jǐn)?shù)表示, 兩組間比較采用卡方檢驗(yàn)。其他數(shù)據(jù)以x ± s 表示, 組間比較采用t 檢驗(yàn)。