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馬傳染性貧血檢疫檢測

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發(fā)布時(shí)間：2025-05-14 05:58:15 更新時(shí)間：2025-05-13 21:44:31

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

馬傳染性貧血檢疫檢測的重要性

馬傳染性貧血（Equine Infectious Anemia, EIA）是由馬傳染性貧血病毒（EIAV）引起的一種慢性、接觸性傳染病，具有高度傳染性和致死性。該病可通過吸血昆蟲（如蚊、虻）傳播，也可通過胎盤垂直感染或污染的器械交叉感染。感染馬匹常表現(xiàn)為間歇性發(fā)熱、貧血、消瘦及多器官損傷，嚴(yán)重威脅馬屬動物健康及畜牧業(yè)經(jīng)濟(jì)。由于EIA無特效治療方法，且潛伏期長、癥狀隱蔽，檢疫檢測成為預(yù)防和控制疫情擴(kuò)散的核心手段。通過科學(xué)規(guī)范的檢測流程，可有效識別帶毒馬匹，阻斷傳播鏈，保障養(yǎng)殖業(yè)安全。

主要檢測項(xiàng)目

馬傳染性貧血的檢疫檢測主要包括以下項(xiàng)目：
1. 抗體檢測：通過檢測血清中特異性抗體（如抗EIAV抗體），判斷是否感染或曾暴露于病毒；
2. 病毒分離與核酸檢測：利用細(xì)胞培養(yǎng)法分離病毒，或通過RT-PCR、熒光定量PCR等技術(shù)檢測病毒核酸；
3. 免疫學(xué)篩查：包括瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)（AGID）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）等，用于快速初篩；
4. 病理學(xué)檢查：對疑似病例進(jìn)行淋巴結(jié)、脾臟等組織的病理切片觀察，輔助診斷。

常用檢測儀器與試劑

檢測過程中需使用專業(yè)儀器和試劑：
- 酶標(biāo)儀：用于ELISA法的光密度值讀??；
- PCR儀：進(jìn)行病毒核酸的擴(kuò)增與檢測；
- 高速離心機(jī)：用于血清分離及病毒富集；
- 電泳系統(tǒng)：核酸電泳驗(yàn)證PCR產(chǎn)物；
- AGID試劑盒：含瓊脂糖凝膠、抗原及陽性對照血清；
- ELISA檢測試劑盒：包被EIAV抗原的微孔板及酶標(biāo)二抗等。

檢測方法與技術(shù)要點(diǎn)

1. 瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)（AGID）：
作為OIE推薦的經(jīng)典方法，通過抗原-抗體在瓊脂凝膠中形成沉淀線判定結(jié)果。需嚴(yán)格控制反應(yīng)溫度（25°C）和時(shí)間（24-48小時(shí)），確保特異性。
2. ELISA檢測：
采用間接法或競爭法，操作便捷且靈敏度高。關(guān)鍵步驟包括血清稀釋、孵育時(shí)間控制及顯色終止時(shí)機(jī)把握。
3. RT-PCR技術(shù)：
針對EIAV保守基因（如gag基因）設(shè)計(jì)引物，提取RNA后反轉(zhuǎn)錄為cDNA進(jìn)行擴(kuò)增。需注意RNA易降解，需全程低溫操作。
4. 免疫印跡（Western Blot）：
用于驗(yàn)證陽性樣本，通過蛋白印跡分析抗體與病毒蛋白的結(jié)合情況，提升結(jié)果準(zhǔn)確性。

檢測標(biāo)準(zhǔn)與規(guī)范

全球范圍內(nèi)遵循以下標(biāo)準(zhǔn)：
- OIE《陸生動物診斷試驗(yàn)手冊》：明確AGID為國際貿(mào)易指定方法，ELISA可作為補(bǔ)充；
- 中國國家標(biāo)準(zhǔn)（GB/T 22915-2008）：規(guī)定EIA診斷技術(shù)規(guī)程，涵蓋采樣、檢測及結(jié)果判定；
- 美國農(nóng)業(yè)部（USDA）指南：要求陽性樣本需經(jīng)國家參考實(shí)驗(yàn)室復(fù)核確認(rèn)；
- 歐盟指令2009/156/EC：強(qiáng)調(diào)跨境運(yùn)輸馬匹必須持有EIA陰性證明。

檢測機(jī)構(gòu)需定期進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證，確保試劑靈敏度≥95%、特異性≥98%，并建立嚴(yán)格的生物安全防護(hù)體系，避免交叉污染。檢測結(jié)果應(yīng)結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查綜合研判，對陽性馬匹實(shí)施撲殺或終身隔離，從源頭控制疫情傳播。