雞傳染性法氏囊病酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)概述
雞傳染性法氏囊?。↖nfectious Bursal Disease, IBD）是一種由傳染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的高度接觸性傳染病，主要危害3-6周齡雛雞，導(dǎo)致免疫抑制，增加繼發(fā)感染風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)養(yǎng)禽業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失。為有效防控該病，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）因其高靈敏性、特異性和高通量檢測(cè)能力，成為實(shí)驗(yàn)室診斷和抗體監(jiān)測(cè)的核心技術(shù)。ELISA檢測(cè)通過定量分析血清或組織樣本中的IBDV抗體或抗原水平，可評(píng)估免疫效果、診斷早期感染及監(jiān)測(cè)病毒流行趨勢(shì)。
檢測(cè)項(xiàng)目
ELISA檢測(cè)在IBD防控中主要涉及以下項(xiàng)目：
1. IBDV抗體水平檢測(cè)：通過檢測(cè)雞群血清中的特異性抗體（IgG），評(píng)估疫苗免疫效果或自然感染后的免疫狀態(tài)。
2. IBDV抗原檢測(cè)：從法氏囊組織或糞便中檢測(cè)病毒抗原，用于確診急性感染病例。
3. 母源抗體監(jiān)測(cè)：針對(duì)雛雞母源抗體水平的檢測(cè)，指導(dǎo)免疫程序制定。
檢測(cè)儀器
ELISA檢測(cè)需依賴以下關(guān)鍵儀器設(shè)備：
1. 酶標(biāo)儀：用于讀取反應(yīng)孔吸光度值（OD值），定量分析抗體或抗原濃度。
2. 洗板機(jī)：自動(dòng)化清洗反應(yīng)板，確保實(shí)驗(yàn)步驟標(biāo)準(zhǔn)化。
3. 恒溫孵育箱：提供穩(wěn)定的溫度環(huán)境（通常37℃），保障抗原-抗體反應(yīng)充分進(jìn)行。
4. 微量移液器：精確加樣，減少人為誤差。
檢測(cè)方法
IBD ELISA檢測(cè)通常采用間接法或雙抗體夾心法，步驟如下：
1. 樣本處理：血清需離心去除雜質(zhì)，組織樣本需勻漿后離心取上清液。
2. 包被抗原/抗體：將IBDV抗原或抗體固定于微孔板。
3. 孵育與洗滌：加入待測(cè)樣本，孵育后洗去未結(jié)合物質(zhì)。
4. 酶標(biāo)二抗孵育：加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的二抗，形成復(fù)合物。
5. 顯色與終止：加入TMB底物顯色，硫酸終止反應(yīng)。
6. 結(jié)果判讀：通過OD值計(jì)算樣本的S/P值（樣本與陽性對(duì)照比值），判斷抗體效價(jià)或抗原存在與否。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)
IBD ELISA檢測(cè)需遵循以下標(biāo)準(zhǔn)：
1. 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：參考《GB/T 36872-2018 禽傳染性法氏囊病診斷技術(shù)》中ELISA操作規(guī)范。
2. 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)：農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布的《動(dòng)物疫病檢測(cè)技術(shù)指南》對(duì)樣本采集、保存及檢測(cè)閾值有明確規(guī)定。
3. 試劑盒標(biāo)準(zhǔn)：使用經(jīng)OIE或中國(guó)獸藥監(jiān)察所認(rèn)證的ELISA試劑盒，確保靈敏度和特異性≥95%。
4. 質(zhì)量控制：每批次檢測(cè)需設(shè)置陽性對(duì)照、陰性對(duì)照和空白對(duì)照，CV值（變異系數(shù)）應(yīng)小于15%。
注意事項(xiàng)
1. 樣本應(yīng)避免反復(fù)凍融，防止抗體效價(jià)降低或抗原降解。
2. 反應(yīng)過程中需嚴(yán)格控制溫濕度，避免非特異性結(jié)合。
3. 不同毒株（經(jīng)典株或變異株）可能影響檢測(cè)結(jié)果，需根據(jù)流行毒株選擇對(duì)應(yīng)試劑盒。
CMA認(rèn)證
檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定證書
證書編號(hào)：241520345370
有效期至：2030年4月15日
CNAS認(rèn)可
實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可證書
證書編號(hào)：CNAS L22006
有效期至：2030年12月1日
ISO認(rèn)證
質(zhì)量管理體系認(rèn)證證書
證書編號(hào)：ISO9001-2024001
有效期至：2027年12月31日
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