流行性造血器官壞死檢疫檢測概述
流行性造血器官壞死（Epizootic Haematopoietic Necrosis，EHN）是由虹彩病毒科（Iridoviridae）中的EHN病毒引起的一種高致死性魚類傳染病，主要影響虹鱒、銀鮭等鮭科魚類。該病以造血組織（如脾臟、腎臟）壞死為特征，具有傳播快、死亡率高的特點，被世界動物衛(wèi)生組織（WOAH）列為必須申報的水生動物疫病。開展EHN檢疫檢測是防控疫情擴散、保障水產養(yǎng)殖業(yè)安全的關鍵環(huán)節(jié)。檢測需覆蓋活魚、魚卵、水體及運輸工具等潛在傳播途徑，結合臨床癥狀觀察與實驗室分析，實現早期診斷與精準防控。
檢測項目
EHN檢測的核心項目包括：
1. 臨床癥狀觀察：檢查魚類是否出現體表出血、鰓蒼白、腹部腫脹及異常游動等典型癥狀。
2. 病原學檢測：通過病毒分離培養(yǎng)確認EHN病毒存在。
3. 分子生物學檢測：利用PCR技術擴增病毒特異性基因片段（如ATP酶基因）。
4. 血清學檢測：采用ELISA或免疫熒光法檢測病毒抗體。
5. 組織病理學檢查：觀察脾臟、腎臟等造血器官的壞死病變及病毒包涵體。
檢測儀器與設備
實驗室檢測需配備以下關鍵儀器：
- PCR儀：用于病毒核酸擴增。
- 熒光顯微鏡：觀察病毒熒光標記或細胞病變效應。
- 高速離心機：處理樣本分離病毒顆粒。
- 電泳儀：驗證PCR產物大小。
- ELISA酶標儀：定量分析抗體或抗原濃度。
- 生物安全柜：確保病毒操作的生物安全性。
檢測方法
1. 病毒分離法：將病魚組織勻漿接種到敏感細胞系（如BF-2細胞），觀察細胞病變（CPE）并進行電鏡鑒定。
2. RT-PCR/實時熒光定量PCR：針對病毒MCP（主要衣殼蛋白）基因設計引物，檢測靈敏度可達102拷貝/μL。
3. 免疫組織化學法：使用特異性單克隆抗體標記感染組織中的病毒抗原。
4. 環(huán)介導等溫擴增（LAMP）：適用于現場快速檢測，30分鐘內完成結果判讀。
5. 血清中和試驗：測定血清中中和抗體效價，評估群體免疫狀態(tài)。
檢測標準與規(guī)范
國際與國內主要依據以下標準：
- WOAH《水生動物衛(wèi)生法典》：規(guī)定EHN的診斷流程和疫情報告要求。
- GB/T 15805.5-2018：中國國家標準中魚類病毒病檢測技術規(guī)范。
- ISO 15586:2003：水質病毒檢測的前處理與富集方法。
- OIE《診斷試驗手冊》：提供病毒分離、PCR引物序列及ELISA操作指南。
檢測結果需滿足：PCR擴增產物與陽性對照一致，病毒分離培養(yǎng)出現典型CPE，且組織病理學檢查符合特征性病變。
CMA認證
檢驗檢測機構資質認定證書
證書編號：241520345370
有效期至：2030年4月15日
CNAS認可
實驗室認可證書
證書編號：CNAS L22006
有效期至：2030年12月1日
ISO認證
質量管理體系認證證書
證書編號：ISO9001-2024001
有效期至：2027年12月31日
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