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病毒性出血性敗血癥檢疫檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-25 08:49:03 更新時(shí)間：2025-07-24 22:15:26

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

病毒性出血性敗血癥檢疫檢測(cè)概述

病毒性出血性敗血癥（Viral Hemorrhagic Septicemia, VHS）是一種由彈狀病毒科病毒引起的嚴(yán)重魚(yú)類傳染病，主要影響鮭科魚(yú)類（如虹鱒、大西洋鮭）和部分淡水魚(yú)類。該病以高死亡率、體表出血、內(nèi)臟器官損傷為特征，已被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（WOAH）列為須申報(bào)的疫病。隨著全球水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，VHS的跨境傳播風(fēng)險(xiǎn)顯著增加，因此快速、準(zhǔn)確的檢疫檢測(cè)技術(shù)對(duì)疫病防控和國(guó)際貿(mào)易至關(guān)重要。

VHS的傳播途徑包括水體、受污染設(shè)備及活魚(yú)運(yùn)輸，其潛伏期為7-15天。早期診斷可顯著降低經(jīng)濟(jì)損失，而檢疫檢測(cè)需結(jié)合臨床癥狀、病理學(xué)特征及實(shí)驗(yàn)室技術(shù)進(jìn)行綜合判斷。以下從檢測(cè)項(xiàng)目、儀器、方法及標(biāo)準(zhǔn)等方面詳細(xì)闡述VHS的檢測(cè)體系。

檢測(cè)項(xiàng)目

VHS檢疫檢測(cè)的核心項(xiàng)目包括：

病原學(xué)檢測(cè)：直接檢測(cè)病毒顆?；虿《竞怂?，如病毒分離培養(yǎng)、RT-PCR檢測(cè)。
血清學(xué)檢測(cè)：通過(guò)ELISA或中和試驗(yàn)檢測(cè)魚(yú)體中的特異性抗體。
分子生物學(xué)檢測(cè)：基于病毒基因序列的實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）或基因測(cè)序技術(shù)。
病理學(xué)檢測(cè)：觀察魚(yú)體組織切片中的出血、壞死等病理變化。
環(huán)境樣本檢測(cè)：對(duì)養(yǎng)殖水體、底泥等介質(zhì)進(jìn)行病毒篩查。

檢測(cè)儀器

VHS檢測(cè)需依賴以下關(guān)鍵儀器設(shè)備：

PCR儀：用于病毒核酸擴(kuò)增，如傳統(tǒng)PCR儀和實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。
酶標(biāo)儀：配合ELISA試劑盒進(jìn)行抗體或抗原的定量分析。
細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)：用于病毒分離的EPC（Epithelioma Papulosum Cyprini）或BF-2細(xì)胞系。
顯微成像系統(tǒng)：觀察細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）及組織病理學(xué)特征。
核酸提取儀：自動(dòng)化提取樣本中的RNA，提高檢測(cè)效率。

檢測(cè)方法

VHS的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法主要包括以下四類：

病毒分離與鑒定：將病魚(yú)組織勻漿液接種至敏感細(xì)胞系，觀察CPE并通過(guò)免疫熒光或電鏡確認(rèn)病毒。
RT-PCR/實(shí)時(shí)熒光定量PCR：針對(duì)病毒G蛋白基因設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增特異性片段（如OIE推薦的靶標(biāo)序列）。
ELISA檢測(cè)：使用單克隆抗體檢測(cè)病毒抗原或血清中的IgM抗體。
免疫組織化學(xué)：通過(guò)標(biāo)記抗體定位組織中的病毒抗原，輔助病理診斷。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

VHS的檢疫檢測(cè)需遵循國(guó)際和國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)：

OIE《水生動(dòng)物衛(wèi)生法典》：規(guī)定VHS的診斷流程和報(bào)告要求。
GB/T 15805.5-2018（中國(guó)）：魚(yú)類病毒性出血性敗血癥診斷技術(shù)規(guī)范。
ISO/TS 15216-1:2017：水產(chǎn)品中病毒檢測(cè)的分子生物學(xué)方法通則。
農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《一、二、三類動(dòng)物疫病名錄》：將VHS列為二類疫病，要求強(qiáng)制檢測(cè)。

檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室需通過(guò)CNAS認(rèn)證，并定期參與WOAH的檢測(cè)能力驗(yàn)證（PT），確保結(jié)果的可比性與可靠性。

總結(jié)

病毒性出血性敗血癥的檢疫檢測(cè)是水產(chǎn)疫病防控體系的核心環(huán)節(jié)。通過(guò)多技術(shù)聯(lián)用（如PCR結(jié)合病毒分離）、標(biāo)準(zhǔn)化操作及嚴(yán)格的質(zhì)量控制，可顯著提升檢測(cè)靈敏度和特異性。未來(lái)，隨著CRISPR等新技術(shù)的應(yīng)用，VHS的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)將進(jìn)一步完善，為全球水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供保障。