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馬流產(chǎn)沙門(mén)氏菌凝集試驗(yàn)檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-25 08:49:03 更新時(shí)間：2025-07-24 22:15:24

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

馬流產(chǎn)沙門(mén)氏菌凝集試驗(yàn)檢測(cè)概述

馬流產(chǎn)沙門(mén)氏菌（Salmonella abortus equi）是引起馬屬動(dòng)物流產(chǎn)和幼駒敗血癥的主要病原體之一，對(duì)馬匹繁殖業(yè)構(gòu)成嚴(yán)重威脅。為有效防控該病，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)成為診斷和監(jiān)測(cè)的關(guān)鍵手段。凝集試驗(yàn)作為一種經(jīng)典的血清學(xué)檢測(cè)方法，因其操作簡(jiǎn)便、成本低廉且特異性較高，被廣泛用于馬流產(chǎn)沙門(mén)氏菌的抗體篩查和病原鑒定。該檢測(cè)通過(guò)抗原與抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)，能夠快速判斷樣本中是否存在目標(biāo)病原或抗體，為臨床診斷和流行病學(xué)調(diào)查提供科學(xué)依據(jù)。

檢測(cè)項(xiàng)目

馬流產(chǎn)沙門(mén)氏菌凝集試驗(yàn)主要包含以下檢測(cè)項(xiàng)目：

1. 菌體抗原（O抗原）檢測(cè)：用于鑒定細(xì)菌的血清型，確認(rèn)是否為馬流產(chǎn)沙門(mén)氏菌；
2. 鞭毛抗原（H抗原）檢測(cè)：輔助區(qū)分不同亞型的沙門(mén)氏菌；
3. 抗體效價(jià)測(cè)定：通過(guò)檢測(cè)血清中特異性抗體的水平，評(píng)估動(dòng)物感染狀態(tài)或免疫效果。

檢測(cè)儀器

凝集試驗(yàn)的開(kāi)展需依賴以下核心儀器設(shè)備：

? 凝集反應(yīng)儀：提供標(biāo)準(zhǔn)化反應(yīng)條件，如恒溫振蕩器；
? 離心機(jī)：用于血清分離及細(xì)菌懸液制備；
? 顯微鏡（配備暗視野或相差鏡頭）：觀察凝集顆粒的形成；
? 微量移液器與96孔板：實(shí)現(xiàn)高精度液體分裝；
? 恒溫培養(yǎng)箱：維持細(xì)菌培養(yǎng)或抗原抗體反應(yīng)的適宜溫度。

檢測(cè)方法

凝集試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化操作流程分為以下步驟：

1. 樣本制備：采集疑似感染馬匹的血液（分離血清）或流產(chǎn)胎兒組織（提取細(xì)菌抗原）；
2. 抗原處理：將標(biāo)準(zhǔn)菌株或待測(cè)菌液經(jīng)甲醛滅活后制備成均勻懸液；
3. 反應(yīng)體系建立：在玻片或試管中將血清樣本與抗原按比例混合；
4. 反應(yīng)觀察：室溫靜置或37℃孵育后，肉眼或顯微鏡下判斷凝集現(xiàn)象；
5. 效價(jià)判定：通過(guò)稀釋法確定血清抗體的最高陽(yáng)性稀釋度。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

該檢測(cè)需嚴(yán)格遵循國(guó)內(nèi)外相關(guān)技術(shù)規(guī)范：

? 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：參照《GB/T 14926.8-2001 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物沙門(mén)氏菌檢測(cè)方法》中的凝集試驗(yàn)要求；
? 行業(yè)指南：依據(jù)《OIE陸生動(dòng)物診斷試驗(yàn)手冊(cè)》對(duì)馬流產(chǎn)沙門(mén)氏菌的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)；
? 結(jié)果判讀：凝集反應(yīng)強(qiáng)度分為0-4級(jí)，效價(jià)≥1:80時(shí)判定為陽(yáng)性；
? 質(zhì)控要求：每批次實(shí)驗(yàn)需同步設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照（標(biāo)準(zhǔn)菌株血清）和陰性對(duì)照（生理鹽水）。