1、 實(shí)驗(yàn)用病毒：感染毒株為SIVmac251中國恒河猴細(xì)胞適應(yīng)株，中國恒河猴PBMCs滴定病毒原液TCID50滴度為5×10⁴ TCID₅₀/mL。

2、 感染動物：選用體重4-6kg的SPF恒河猴。實(shí)驗(yàn)前體檢無異常，必須排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆轉(zhuǎn)錄D型病毒(SRV-1，2，5)和猴T淋巴細(xì)胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒（SIV）易感性密切相關(guān)的4種基因（Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17）篩查結(jié)果為陰性。所有感染動物必須在ABSL-3室中進(jìn)行。

3、 感染方法：將麻醉好的實(shí)驗(yàn)猴放在操作臺上，動物采取俯臥位以保證直腸粘膜充分暴露，緩慢將10000

TCID₅₀的SIVmac251病毒液2mL注入肛竇處，實(shí)驗(yàn)猴保持此姿勢30min。

4、 SIVmac251直腸感染猴樣品采集和指標(biāo)測定：在感染前和感染后3、7、10、14、21、28、35、42、56、70、84天采集EDTA抗凝血4mL，分別測定血常規(guī)、血漿病毒載量、CD4+/CD8+、CD4+和CD8+細(xì)胞絕對數(shù)。

5、 SIVmac251直腸感染猴血漿病毒載量的測定：提取EDTA抗凝血漿中病毒RNA，使用SYBR Green I 實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法測定血漿病毒載量。

6、 SIVmac251直腸感染猴外周血CD4+/CD8+比值及絕對數(shù)測定：CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗體標(biāo)記EDTA抗凝全血淋巴細(xì)胞，流式細(xì)胞儀測定CD4+/CD8+比值，并根據(jù)血常規(guī)結(jié)果，計(jì)算出CD4+和CD8+細(xì)胞絕對數(shù)。