人腸道病毒71型感染人PSGL1轉(zhuǎn)基因小鼠模型
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發(fā)布時(shí)間:2025-07-25 08:49:03 更新時(shí)間:2025-08-28 10:22:18
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作者:中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心
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資源中文名稱 | 人腸道病毒71型感染人PSGL-1轉(zhuǎn)基因小鼠模型 |
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資源英文名稱 | |
疾病概述 | 手足口病是腸道病毒引起的傳染性、出疹性疾病,該病多發(fā)生于5歲以下的嬰幼兒,可引起發(fā)熱和手、足、口腔等部位的皮疹、潰瘍,個(gè)別手足口病患者可引起心肌炎、肺水腫、無(wú)菌性腦膜腦炎等并發(fā)癥,而神經(jīng)源性肺水腫、肺出血和心力衰竭被認(rèn)為是導(dǎo)致死亡的主要原因。 引發(fā)手足口病的腸道病毒有20多種,包括柯薩奇病毒A組和B組、人腸道病毒71型(EV71)以及皰疹病毒、腺病毒等,其中以柯薩奇病毒A16型(CA16)和腸道病毒71型(EV71)最為常見。而絕大多數(shù)重癥手足口病病例,均由EV71或CA16病毒感染所致。 EV71屬于微小RNA病毒科,腸道病毒屬,主要通過(guò)糞口傳播,病毒最初定植于鼻咽部或胃腸道粘膜,侵入淋巴組織并在其中繁殖,進(jìn)而引起第一次病毒血癥。若機(jī)體免疫力差,病毒可擴(kuò)散至全身組織器官,大量繁殖后再次入血,引起第二次病毒血癥,最終侵犯靶器官,如腦、腦膜、脊髓、心肌和橫紋肌以及皮膚黏膜組織,引起重癥病變,尸檢時(shí)主要病變?yōu)樯窠?jīng)元壞死等。 日本學(xué)者指出PSGL-1蛋白是人的EV71病毒受體,在小鼠細(xì)胞內(nèi)表達(dá)人PSGL-1蛋白可以提高小鼠細(xì)胞對(duì)EV71的敏感性。建立骨骼肌和神經(jīng)組織表達(dá)人PSGL-1蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠,可提高小鼠對(duì)病毒的敏感性,有望提高敏感小鼠的年齡,從而建立成年的EV71感染模型。 |
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物背景信息 | 背景品系:C57BL/6J,表達(dá)人PSGL-1蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠,動(dòng)物品系名稱為:C57BL/6J-TgN(CMV-Homo-PSGL-1)-ZLFILAS。 |
模型制作方法 | 轉(zhuǎn)基因小鼠構(gòu)建 以人PSGL-1的mRNA為模板,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄獲得人PSGL-1的cDNA,將其插入pCDNA3.1(+)載體的啟動(dòng)子下游,構(gòu)建轉(zhuǎn)基因載體。載體經(jīng)測(cè)序驗(yàn)證正確后,將其線性化并經(jīng)顯微注射到C57BL/6J的受精卵中,用129做假孕受體,制備轉(zhuǎn)基因小鼠。轉(zhuǎn)基因小鼠提取鼠尾DNA進(jìn)行基因鑒定(h-PSGL-F: 5’-CTACCAAAAGAGGTCTGTTC-3’;h-PSGL-R: 5’-ATGAGATGCAGACCATCTCG-3’),采用RT-PCR法檢測(cè)組織內(nèi)基因表達(dá)情況(h-PSGL-CF: 5’-GTGGTGCTGGCGGTCCG-3’;h-PSGL-CR: 5’-CAGGCCCCCATTGGCTGTG-3’),并用兔抗人PSGL-1的多克隆抗體檢測(cè)組織內(nèi)蛋白表達(dá)情況。 1、病毒制備
檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)證書![]()
CMA認(rèn)證
檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定證書證書編號(hào):241520345370
有效期至:2030年4月15日
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CNAS認(rèn)可
實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可證書證書編號(hào):CNAS L22006
有效期至:2030年12月1日
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ISO認(rèn)證
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有效期至:2027年12月31日
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