人結(jié)直腸癌細(xì)胞（HCT116）是1979年M.Brattain等從患結(jié)腸癌的男性病人中分離的三株惡性結(jié)直腸癌細(xì)胞系之一，在裸鼠可形成上皮樣的腫瘤，是用于研究癌癥生物學(xué)特性的常見細(xì)胞株。體外研究發(fā)現(xiàn)HCT116是一種生長因子獨(dú)立的細(xì)胞系，具有侵入和高運(yùn)動(dòng)能力[1]。皮下移植實(shí)驗(yàn)表明此細(xì)胞株高致瘤性。利用脂質(zhì)體2000將綠色熒光標(biāo)記表達(dá)載體chicken β-actin-GFP-NEO轉(zhuǎn)染HCT116細(xì)胞,通過G418抗生素篩選到一株穩(wěn)定高表達(dá)綠色熒光蛋白(eGFP)的單克隆人結(jié)直腸癌細(xì)胞（HCT116）細(xì)胞，命名為HCT-116-eGFP, 該單克隆細(xì)胞在熒光顯微鏡下呈強(qiáng)熒光，熒光較均勻的分布于整個(gè)細(xì)胞內(nèi),傳代數(shù)次后仍能穩(wěn)定高水平表達(dá)GFP , 細(xì)胞形態(tài)和未轉(zhuǎn)染細(xì)胞無明顯區(qū)別(圖1)。

圖1   HCT116穩(wěn)定高表達(dá)GFP的單克隆細(xì)胞株（200×）和綠色熒光表達(dá)載體的構(gòu)建

　　將對(duì)數(shù)生長期的HCT-116-eGFP細(xì)胞皮下接種于2只BALB/CA-nu，接種細(xì)胞數(shù)量為1×10⁶/只, 采用活體熒光影像系統(tǒng)攝像動(dòng)態(tài)觀察。模型制作采用的BALB／CA-nu裸小鼠，鼠齡5周，體重15—18 g，在無特定病原體(specific—pathogen free，SPF)的飼養(yǎng)間飼養(yǎng)。