Prkra小耳小鼠(B6.Cg-Prkralear)

1. Prkra小耳小鼠繁殖

小鼠飼養(yǎng)條件是按照普通常規(guī)鼠籠飼養(yǎng),每個籠不超過5只小鼠。繁殖方式：用同窩的1只雄性和1只雌性交配獲得雜合小鼠，飼養(yǎng)到可以生育的成年鼠后,然后雜合與雜合再交配，得到沒有表型的雜合雌、雄小鼠。

2. Prkra 小耳小鼠的基因點突變檢測

DNA 測序:設計引物進行Sanger法測序，應用試劑盒法裂解鼠尾提取DNA，洗脫出的DNA 于-20 ℃ 保存。通過引物3 在線平臺( http:/ /primer3.ut.ee/ )設計候選變異引物，Prkra 正向引物為TTCAGTAGCGAGCCAGCAC,反向引物為ACAACTGTCCGCTCTGTCG。聚合酶鏈式反應(PCR)反應體系:金牌Mix(green)27 μl，正向引物1 μl,反向引物1 μl，模板DNA 1 μl。

Prkra 小耳小鼠野生型(上)、雜合型(中)和純合型(下)的測序峰圖，突變位點為在2 號染色體76、643、218 bp(GRCm38)上的G向A的突變,該突變位點位于第3 外顯子之后。