外源性補(bǔ)充DLHcy誘導(dǎo)伴高同型半胱氨酸血癥的小鼠動脈粥樣硬化模型
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發(fā)布時(shí)間:2025-07-25 08:49:03 更新時(shí)間:2025-07-25 08:13:07
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作者:中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心
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資源中文名稱 | 外源性補(bǔ)充 DL-Hcy誘導(dǎo)伴高同型半胱氨酸血癥的小鼠動脈粥樣硬化模型 |
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資源英文名稱 | DL-Hcy-induced HHcy-accelerated Atherosclerosis in ApoE-/- mice |
疾病概述 | 同型半胱氨酸(Homocystine , Hcy)在結(jié)構(gòu)上與半胱氨酸、蛋氨酸相似,其在體內(nèi)有多種存在形式,且大部分以二硫化物氧化形式存在。不同形式的Hcy 總稱為總同型半胱氨酸,目前診斷所說的血漿同型半胱氨酸水平即體內(nèi)總同型半胱氨酸水平。 Hcy 是含硫氨基酸,在體內(nèi)經(jīng)蛋氨酸甲基化生成,且主要通過再甲基化途徑、轉(zhuǎn)硫途徑及釋放到細(xì)胞外液這三種途徑代謝。在人體內(nèi),Hcy 在血漿中的正常濃度為5-10μM,當(dāng)血漿Hcy 水平超過10μM時(shí)即可診斷為高同型半胱氨酸血癥(Hyperhomocystenemia, HHcy)。按照血漿Hcy 水平可將 HHcy 分為輕度(10-30μM),中度(30-100μM)和重度(大于100μM)。 |
實(shí)驗(yàn)動物背景信息 |
6周齡ApoE-/-雄性小鼠,體質(zhì)量18-22 g。 |
模型制作方法 |
1 實(shí)驗(yàn)材料 1.1 實(shí)驗(yàn)動物 選擇50 只健康雄性ApoE-/- 小鼠,體質(zhì)量18-22 g,均購于北京華阜康華生物科技股份有限公司。飼養(yǎng)于中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物研究所動物中心動物房內(nèi),5只/盒屏障系統(tǒng)中,溫度( 22±2) ℃,濕度50% ~ 60%,12 h 循環(huán)照明,小鼠自由攝取食、水,IACUC號:ILAS-YZW2019001。 1.2儀器與試劑 采用全自動生化分析儀檢測血漿總同型半胱氨酸(Homocystein, Hcy)、三酰甘油( triglyceride, TG) 、總膽固醇( total cholesterol, TC) 、低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein, HDL)生化指標(biāo)。同型半胱氨酸:DL-Hcy (Sigma-Aldrich,H4628),使用濃度為1.8g/L。 2 方法 2.1 動物模型制備 6周齡 ApoE-/- 小鼠采用普通飼料喂養(yǎng),飲水中外源性補(bǔ)充DL-Hcy的方式誘導(dǎo)伴高同型半胱氨酸的動脈粥樣硬化動物模型。造模用DL-Hcy貨號為 (Sigma-Aldrich,H4628),使用濃度為1.8g/L,每三天更換一次飲水,并記錄飲水量,持續(xù)造模14周,并在第6 周和12 周分別取血及主動脈竇冰凍切片檢測血清Hcy水平及斑塊大小以判斷模型進(jìn)展。 2.2 標(biāo)本采集及處理 完成DL-Hcy持續(xù)干預(yù)14周后,稱體重,戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉小鼠,下腔靜脈取血,室溫靜置2h后于4℃ 3000r離心10分鐘提取血清,-80℃冰箱凍存。同時(shí)取主動脈竇10%中性福爾馬林中固定,30%蔗糖脫水,冰凍切片包埋劑包埋并切片;其余血管組織液氮冷凍-80℃保存。 |
動物模型的評價(jià)與驗(yàn)證 | |
保存方式 | |
更多相關(guān) | 動物模型制備 |
證書編號:241520345370
證書編號:CNAS L22006
證書編號:ISO9001-2024001
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