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IFITM6敲除小鼠_模型

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發(fā)布時間：2025-07-25 08:49:03 更新時間：2025-07-25 08:13:04

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

資源中文名稱

IFITM6敲除小鼠_

資源英文名稱

IFITM6 gene knockout mice

疾病概述

固有免疫是機(jī)體防御外來病毒感染的第一道防線，通過識別病原并產(chǎn)生各種細(xì)胞因子、趨化因子、干擾素（IFN）等多種抗病毒因子。干擾素誘導(dǎo)的跨膜蛋白（IFITM家族），是一類具有抗病毒作用的ISG（干擾素誘導(dǎo)基因）的編碼產(chǎn)物，并證明其在多種生物過程中發(fā)揮作用，具有廣泛的抗病毒作用，并在免疫信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞歸巢等發(fā)揮作用。 IFITM家族包括IFITM1、IFITM2、IFITM3、IFITM5、IFITM6、IFITM7和IFITM10，除了IFITM5特異性表達(dá)與骨細(xì)胞，不依賴與IFN的表達(dá)，其余家族在IFN的調(diào)控下在多組織和器官廣泛表達(dá)。其中，F(xiàn)ITM1、IFITM2、IFITM3、IFITM5和IFITM10在人類中表達(dá)，F(xiàn)ITM1、IFITM2、IFITM3、IFITM5和IFITM6在小鼠中表達(dá)（圖1）。

實(shí)驗動物背景信息

實(shí)驗所用小鼠（C57BL/6）背景。C57BL/6小鼠也被稱為C57 black 6，也稱作B6。1921年被培育出來，屬于近交品系。該品系的最主要的兩個特點(diǎn)就是品系穩(wěn)定和易于繁殖。主要用途包括：作為生理學(xué)與病理學(xué)的實(shí)驗動物模型、構(gòu)建轉(zhuǎn)基因動物模型、作為產(chǎn)生自發(fā)突變和誘發(fā)突變的同基因型小鼠的背景品系。該品系在國內(nèi)使用頻率高，價格相對便宜。

模型制作方法

3.1 實(shí)驗材料

3.1.1 實(shí)驗動物

C57BL/6購自北京維通利華實(shí)驗動物技術(shù)有限公司 SCXK(京）2016-0006。超排用雌鼠數(shù)量10-15只，年齡3周齡，交配傳代用野生型鼠為成年8-10周齡小鼠。實(shí)驗中基因工程小鼠由本實(shí)驗室繁殖產(chǎn)生。實(shí)驗中涉及動物的操作程序已獲得中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗動物研究所實(shí)驗動物使用與管理委員會的批準(zhǔn)，批準(zhǔn)號為ZLF18004.

3.1.2實(shí)驗儀器

儀器及耗材	生產(chǎn)廠商
NanoZoomer S60數(shù)字病理切片掃描儀	日本濱松光子學(xué)株式會社
激光共聚焦掃描顯微鏡	Leica
流式細(xì)胞儀	BD
透射電子顯微鏡	JEOL
顯微注射儀	Nikon
光學(xué)顯微鏡	Nikon
化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)	BIO-RAD
PCR儀	BIO-RAD
Realtime PCR儀	ABI
冰凍切片機(jī)	Leica
電泳儀	BIO-RAD
電泳槽	Tanon
數(shù)碼凝膠圖像處理系統(tǒng)	Tanon
組織勻漿機(jī)	POLYTRON
恒溫培養(yǎng)箱溫控振蕩箱	Incucell TAITEC
離心機(jī)	Eppendorf
搖床	SCILOGEX
塑料薄膜封口機(jī)	德清拜杰有限公司
電動鼓風(fēng)干燥箱	天津市泰斯特儀器有限公司
電子稱量器（量程0.5g-620g）	奧豪斯儀器（常州）有限公司
電子稱量器（量程0.1mg-220g）	Sartorius
4℃冰箱	海爾集團(tuán)
-80℃冰箱	SANYO
-20℃冰箱	SANYO
渦旋振蕩器	上海滬西分析儀器廠
移液器	Eppendorf

3.1.3實(shí)驗試劑

試劑	生產(chǎn)廠商
體外轉(zhuǎn)錄用試劑盒	Ambion
Taq DNA聚合酶	TaKaRa
T7 轉(zhuǎn)錄試劑盒	Invitrogen
T4 DNA裂連接	TaKaRa
膠回收試劑盒	Qiagen
質(zhì)粒提取試劑盒	Axygen
Trizol試劑	Invitrogen
逆轉(zhuǎn)錄試劑盒 DNA提取試劑盒	Invitrogen 北京全式金生物科技有限公司
GADPH	Santa Cruz Biotechnology
NC膜	Millipore
化學(xué)發(fā)光液	Immuno Cruz
蛋白質(zhì)分子量標(biāo)記物	Takara
蛋白酶抑制劑	羅氏
組織裂解液	Thermo
麗春紅	Beyotime
BCA試劑盒	Beyotime
Western blot 洗液（10×）	Beyotime
30%Acr-Bis	Beyotime
SDS-PAGE電泳液	Beyotime
Western blot轉(zhuǎn)膜液（粉劑）	Beyotime
TEMED	Beyotime
過硫酸銨	Beyotime
1.5 M Tris·HCl（pH=8.8）緩沖液	Beyotime
1 M Tris·HCl（pH=6.8）緩沖液	Beyotime
瓊脂	BD公司
異丙醇	北京化工廠
脫脂奶粉	內(nèi)蒙古伊利實(shí)業(yè)集團(tuán)股份有限公司
Anti-Flag	sc-166384