C57BL/6J

擴增并經(jīng)測序比對正確的cTnT^R141W突變片段插入α-MHC啟動子下游構(gòu)建心臟特異表達cTnT^R141W表達載體（圖1A）。用顯微注射法將線性化的轉(zhuǎn)基因載體注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中，用ICR小鼠作假孕受體，制備轉(zhuǎn)基因小鼠。PCR法鑒定小鼠基因型（圖1B），Northern Blot法分析cTnT^R141W的表達情況（圖2）。

圖1. cTnT^R141W轉(zhuǎn)基因小鼠模型的建立及鑒定

注：(A) 將cTnT^R141W突變基因片段插入α-MHC心臟組織特異性啟動子下游構(gòu)建轉(zhuǎn)基因表達載體. (B) PCR法鑒定小鼠基因型. 1: 陽性對照；2: 分子量標(biāo)記；20:陰性對照；21:空白對照；3,15,18: cTnT^R141W陽性轉(zhuǎn)基因小鼠；其余為陰性轉(zhuǎn)基因小鼠.

圖2. Northern Blot法分析cTnT^R141W轉(zhuǎn)基因小鼠心肌組織cTnT的表達

（A）Northern Blot法觀察內(nèi)源及轉(zhuǎn)基因外源cTnT基因RNA的表達情況. (B) PCR法分析未經(jīng)及經(jīng)酶消化后cTnT的表達，1,2:野生小鼠基因組對照；3,4:首建鼠1號；5,6:首建鼠13號；7,8:首建鼠16號.